1.2微生物的培养技术及应用第3课时课件 高二下学期生物人教版选择性必修3.pptxVIP

第3课时第2节微生物的培养技术及应用

说出选择培养基的概念及原理。掌握稀释涂布平板法的操作过程。归纳总结分离微生物的过程和测定微生物数量的常用方法。

酵母菌的纯培养2.接种和分离酵母菌1.制备培养基3.培养酵母菌①配制培养基（马铃薯、葡萄糖、琼脂、水）②灭菌③倒平板（在酒精灯火焰附近操作）培养基：湿热灭菌（高压蒸汽灭菌锅）培养皿：干热灭菌（干热灭菌锅）用接种环在固体培养基上用平板划线法接种平板倒置，放入28℃左右的恒温培养箱培养自然界中微生物数量繁多，种类庞杂，要想从中分离出需要的特定微生物并不容易，尤其当要分离的微生物在混合菌群中不是优势种群时，仅通过一般的平板划线法或稀释涂布平板法很难实现。该怎么办呢？选择培养基应运而生

1973年，科学家从美国黄石国家公园的热泉中筛选出水生栖热菌，进而从这种菌中提取出耐高温的DNA聚合酶。这种酶已被广泛用于体外扩增DNA片段。耐高温的酶耐高温生物体高温环境（热泉、火山口）寻找寻找1.筛选思路：2.以上实例对我们从众多微生物中分离出需要的特定的微生物有何启示？寻找耐高温的DNA聚合酶从生活中来

2.启示：寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。耐寒微生物耐热微生物石油分解菌这对在实验室中选择培养特定的微生物有什么启示？如何筛选？什么是选择培养基？从生活中来

一、选择培养基2.选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。人为提供有利于目的菌生长的条件（包括营养、温度和PH等），同时抑制或阻止其他微生物的生长。1.实验室中微生物筛选的原理：

加入某些特定的物质（创造特殊环境）加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌加高浓度食盐分离得到金黄色葡萄球菌改变培养基的营养成分培养基缺乏氮源时可分离固氮微生物培养基缺乏有机碳源时异养微生物无法生存，而自养微生物可利用空气中的CO2制造有机物而生存。在高温环境中可分离得到耐高温微生物课外拓展

利用培养基“特定化学成分”分离当石油为唯一碳源时当尿素是唯一氮源时当以纤维素为唯一碳源时不能利用石油的微生物不能生存，能够利用石油的微生物能生存，从而分离出能降解石油的微生物。不能利用尿素的微生物因缺乏氮源而不能正常生长，能够分解尿素的微生物能利用尿素作为氮源而正常生长。能分解纤维素的微生物具有更多的生存机会而大量繁殖。课外拓展

尿素[CO(NH2)2]含氮量高，化学性质相对稳定，是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素施入土壤后，会被土壤中的某些细菌分解成NH3，NH3再转化为NO-、NH4＋等被植物吸收。而这些细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶，脲酶催化尿素分解产生NH3，NH3可作为细菌生长的氮源。CO(NH2)脲酶+H2O+CO22NH3NO-、NH4＋被植物吸收1.如果让你配置一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？2.该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？选择培养基配方的设计思考·讨论

1.如果让你配置一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，用尿素作为唯一氮源,可以将分解尿素的细菌分离出来。2.该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？这种培养基与普通培养基相比，只是用尿素作为唯一氮源，培养基的其他营养成分基本相同。脲酶催化尿素分解产生NH3，NH3可作为细菌生长的氮源。选择培养基配方的设计思考·讨论

如何证明一个选择培养基具有选择性？设置基础培养基（如牛肉膏蛋白胨培养基）或完全培养基作为对照，若基础培养基或完全培养基中生长的菌落数多于该选择培养基，则该选择培养基具有选择性。基础培养基选择培养基仅通过选择培养基可以知道1g土壤中有多少能分解尿素的细菌吗？一、选择培养基

研究课题：1g土壤中有多少能分解尿素的细菌分离：获得尿素分解菌的纯培养物计数：测定尿素分解菌数量用平板划线法接种培养结果的图片如下。请结合图片分析，平板划线法能否达到对细菌进行计数的目的？为什么？不能平板划线法最开始的划线很可能菌类会长成一片，导致无法计数，此外灼烧接种环的时候也会杀死一部分菌类。稀释涂布平板法二、微生物的选择培养

是将菌液进行一系列梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。1.概念：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过计数平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。2.原理：恰当的稀释度、涂布是否均匀是成功统计菌落数目的关键。3.关键：测定细菌1ⅹ104、1ⅹ1