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多糖的分离与纯化

Contents多糖的基本认识多糖的提取多糖的分离与纯化多糖的生产现实状况与前景4123

多糖多糖又称多聚糖(polysaccharide)，由单糖聚合成聚合度不小于10的极性大分子，分子量为数万至数百万，是构成生命活动的4大基本物质之一，与生命的多种生理功能亲密有关。

多糖的分类按来源可分为动物多糖、植物多糖、微生物多糖和藻类多糖；按酸碱性可分为酸性多糖、中性多糖及碱性多糖；按溶解性可分水溶性多糖、水不溶性多糖、酸性多糖和碱性多糖等；按构成成分可分为均多糖和杂多糖。

多糖的功能与应用多糖具有明显的药效功能,如增强免疫功能、抗肿瘤、降血糖、抗衰老、抗病毒作用等，广泛应用于制药领域。除此，还在食品、石油和化工等多种领域应用广泛，例如制成保鲜剂、胶凝剂、成膜剂、乳化剂。

多糖的提取多糖提取措施有热水浸提法、酸提、碱提、有机溶剂提取、酶法提取等，常以微波和超声波辅助强化。水溶性多糖可采用水提法，水不溶性多糖一般用碱或酸法提取。

常规水提法

三氯乙酸法?(TCA法)

配制质量浓度为l%的粗多糖溶液，加入1%TCA，振摇?20min后静置?30min，然后离心除去沉淀，取上清液反复以上操作2次氯化钙法

配制质量浓度为1%的粗多糖溶液，调整pH值为8一9，加热至85℃，加氯化钠使其浓度为5%，搅拌，冷却，离心。盐酸法

配制质量浓度为l%的粗多糖溶液，向溶液中逐滴加入?2mol.l一1的盐酸溶液，调pH值为3，4oC放置12h，离心。

分离与纯化1、DEAE-52离子互换柱层析将提获得到的蛹虫草粗多糖分别配制成浓度为10mg/mL溶液后用DEAE-52阴离子互换柱进行层析，依次用蒸馏水、0.1mol/L、0.2mol/L和0.3mol/LNaCl溶液洗脱，用苯酚-硫酸法跟踪检测，得到4种粗多糖的洗脱曲线见图2.2。

从图中可以看到四种粗多糖均有两个洗脱峰，第一种峰是穿透峰，为蒸馏水洗脱的多糖组分，为不带电荷的中性多糖；第二个峰即主峰则为NaCl溶液洗脱的带负电荷的酸性多糖组分。分别搜集这4个主峰部分的洗脱溶液，透析后冻干得到乳白色絮状的4种蛹虫草酸性多糖组分，将深入用SephadexG-100凝胶柱纯化。

2、SephadexG-100凝胶柱层析将经DEAE-52柱层析后所得到的4种酸性多糖组分，再运用SephadexG-100层析柱的分子筛作用进行深入纯化。用蒸馏水作为洗脱液，洗脱曲线如图2.3所示。

由图可见，4种酸性多糖组分经SephadexG-100凝胶柱分级纯化后均得到一种单一对称的洗脱峰，阐明已经得到只含单一组分的纯多糖。分别搜集对称峰尖处的溶液，冻干后即得乳白色絮状的4种蛹虫草纯多糖组分CM-jd-CPS、CM-hs-CPS、CM-js-CPS和CM-jd(Y)-CPS。

多糖的现实状况与前景目前，全世界微生物多糖年需求量约为80-100万吨，工业年产值可达50-100亿美元世界上微生物多糖的产量和年增长量均在10%以上，尤其是某些新型多糖年增长量在30%以上。我国在该领域的研究相对起步较晚，对其研究尚处在初级阶段，大部分集中在食品食品添加剂和造纸应用等方面，在生物医用材料上的开发应用报道较少。

在既有基础上更广泛的开展微生物多糖应用基础的研究，拓展其应用领域；根据不一样用途，研究下游分离提取工艺，减少生产成本，开发不一样规格的产品系列，满足多元化市场需求，具有积极的现实意义。不过怎样改善适于工业化生产的提取、分离、纯化措施以提高资源的运用率，节省能源，也显得极为重要。

参照文献[1]王涛,赵谋明.??多糖的研究进展[J].现代食品科技.(01)[2]吴凤瑶,杜仲争.蛹虫草多糖的分子构造及生物活性研究.江苏科技大学.(04)[3]申利红,王建森,李雅,张大海,朱廷春.??植物多糖的研究及应用进展[J].中国农学通报.(02)[4]黄汉武,曾伟,陈桂光.??微生物多糖工业化研究进展[J].轻工科技.(05)[5]方积年,丁侃.天然药物:多糖的重要生物活性及分离纯化措施[J].中国天然物,,5(5):338-347.[6]徐晓飞,陈健.多糖含量测定的研究进展[J].食品科学.,30(21)[7]魏传晚,曾和平,王晓娟等.多糖及其研究进展简述.广东化工.(01)

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