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pcr上岗证考试题及答案

单项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR技术的中文全称是（）

A.聚合酶链式反应B.核酸扩增反应C.基因复制反应

答案：A

2.Taq酶的特点是（）

A.耐高温B.耐低温C.耐高压

答案：A

3.PCR反应体系中不包括（）

A.引物B.dNTPC.蛋白质

答案：C

4.引物设计的原则不包括（）

A.长度适宜B.避免互补C.富含稀有碱基

答案：C

5.PCR反应的变性温度一般为（）

A.55℃B.72℃C.94℃

答案：C

6.延伸温度一般是（）

A.55℃B.72℃C.94℃

答案：B

7.退火温度与引物Tm值关系是（）

A.高于Tm值B.低于Tm值C.等于Tm值

答案：B

8.以下哪种物质可抑制PCR反应（）

A.甘油B.血红蛋白C.二甲基亚砜

答案：B

9.一个完整的PCR循环不包括（）

A.变性B.转录C.延伸

答案：B

10.PCR技术的发明人是（）

A.穆利斯B.沃森C.克里克

答案：A

多项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR反应需要的基本条件有（）

A.模板DNAB.引物C.Taq酶D.dNTP

答案：ABCD

2.引物设计时需要考虑的因素有（）

A.长度B.碱基组成C.特异性D.引物间互补性

答案：ABCD

3.影响PCR反应的因素包括（）

A.温度B.时间C.镁离子浓度D.模板浓度

答案：ABCD

4.PCR技术的应用领域有（）

A.疾病诊断B.法医鉴定C.基因克隆D.物种鉴定

答案：ABCD

5.PCR产物分析方法有（）

A.琼脂糖凝胶电泳B.聚丙烯酰胺凝胶电泳C.测序D.酶切分析

答案：ABCD

6.下列属于热稳定DNA聚合酶的有（）

A.Taq酶B.Pfu酶C.Vent酶D.Klenow片段

答案：ABC

7.提高PCR特异性的方法有（）

A.优化引物设计B.调整反应条件C.使用降落PCRD.巢式PCR

答案：ABCD

8.PCR反应体系的主要成分包括（）

A.缓冲液B.模板C.引物D.酶

答案：ABCD

9.引物的作用有（）

A.引导DNA合成起始B.决定扩增片段长度C.提高反应特异性D.加速酶的活性

答案：ABC

10.以下哪些情况可能导致PCR失败（）

A.模板降解B.引物设计错误C.酶失活D.反应体系污染

答案：ABCD

判断题（每题2分，共10题）

1.PCR技术可以扩增任意长度的DNA片段。（）

答案：错

2.Taq酶没有3-5外切酶活性。（）

答案：对

3.引物越长，PCR反应的特异性越好。（）

答案：错

4.PCR反应中镁离子浓度对反应无影响。（）

答案：错

5.退火温度越高，PCR反应的特异性越低。（）

答案：错

6.只要引物设计正确，PCR反应就能成功。（）

答案：错

7.热启动PCR可以提高反应特异性。（）

答案：对

8.PCR产物只能通过电泳检测。（）

答案：错

9.模板DNA浓度越高，PCR反应效果越好。（）

答案：错

10.不同的DNA聚合酶适用于不同的PCR应用。（）

答案：对

简答题（每题5分，共4题）

1.简述PCR技术的基本原理。

答案：PCR技术是利用DNA半保留复制原理，在引物、模板、Taq酶、dNTP等存在下，经过高温变性、低温退火、适温延伸三个步骤的循环，使目的DNA片段呈指数级扩增。

2.引物设计的基本要求有哪些？

答案：长度一般18-25bp；碱基分布均匀，避免富含AT或GC；引物自身及引物间避免互补；引物3端不能有错误配对；具有特异性，与模板能准确结合。

3.影响PCR反应的主要因素有哪些？

答案：包括温度（变性、退火、延伸温度）、时间（各阶段时间）、镁离子浓度、模板浓度、引物浓度、酶的活性及用量、dNTP浓度等，这些因素会影响PCR反应的特异性和产量。

4.简述PCR产物的常见分析方法。

答案：常用琼脂糖凝胶电泳初步分析产物大小和浓度；聚丙烯酰胺凝胶电泳分辨率更高；测序可确定产物序列；酶切分析用于