生物微生物的培养和应用.pptVIP

生物微生物的培养和应用第1页，共34页，星期日，2025年，2月5日专题二考点一微生物的培养与计数考点二微生物的分离第2页，共34页，星期日，2025年，2月5日考点一微生物的培养与计数温度第3页，共34页，星期日，2025年，2月5日温度特殊营养物质如生长因子：微生物生长必需，而自身不能合成的化合物，如：维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶等。第4页，共34页，星期日，2025年，2月5日(3)种类：按功能分为种类制备方法原理用途举例选择培养基加入某些特殊的化学物质依据微生物对某些物质的依赖性或抗性而设计从多种微生物中分离出所需微生物加入青霉素杀死细菌,进而分离得到酵母菌和霉菌等鉴别培养基加入某种指示剂或化学药品依据指示剂或化学药品产生特定颜色或其他变化从多种微生物中鉴别出某些种类的微生物用刚果红培养基鉴别分解纤维素的微生物(3)种类：按化学组成分为合成培养基和天然培养基第5页，共34页，星期日，2025年，2月5日注意(1)并不是所有培养基的营养成分都相同。①自养微生物能够利用空气中的CO2合成有机物,培养基中不需加入有机碳源(可加入无机碳源)。②固氮微生物能够固定空气中的N2,合成氨态氮,培养基中不需添加氮源。(2)培养基中不同的营养成分可以由同一物质提供,有些物质,如NH4HCO3,既是氮源也是某些自养生物的碳源。第6页，共34页，星期日，2025年，2月5日第7页，共34页，星期日，2025年，2月5日（4）消毒与灭菌条件结果常用方法应用范围消毒较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)煮沸消毒法日常用品巴氏消毒法不耐高温的液体化学药剂消毒法用酒精擦拭双手,用氯气消毒水源灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物(包括芽孢和孢子)灼烧灭菌法接种工具干热灭菌法玻璃器皿、金属工具高压蒸汽灭菌法培养基及相关容器第8页，共34页，星期日，2025年，2月5日3.大肠杆菌纯化培养计算称量溶化灭菌倒平板根据配方比例准确称取各成分玻棒不断搅拌，防止琼脂糊底导致烧杯破裂培养基（高压蒸汽灭菌）、培养皿（干热灭菌）见教材P17（1）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基第9页，共34页，星期日，2025年，2月5日倒平板技术第10页，共34页，星期日，2025年，2月5日1.培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？问题讨论答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。第11页，共34页，星期日，2025年，2月5日3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？答：凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入凝结水珠培养基，造成污染。答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。第12页，共34页，星期日，2025年，2月5日（2）纯化大肠杆菌Ⅰ、平板划线法原理：最常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。经过数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌落。第13页，共34页，星期日，2025年，2月5日操作流程灼烧接种环冷却划线（第一区域）蘸取菌液灼烧接种环冷却划线（第二区域）灼烧接种环冷却划线（第三区域）灼烧接种环冷却划线（第四区域）灼烧接种环冷却划线（第五区域）灼烧接种环平板倒置放置培养第14页，共34页，星期日，2025年，2月5日①接种环的灼烧。(1)第一次操作：。(2)每次划线之前：杀死残留的菌种，使?的菌种直接来源于上次划线的末端。(3)划线结束后：杀死，避免细菌污染环境和感染操作者。②灼烧接种环之后,要冷却后再进行操作,以免温度太高杀死菌种。③划