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pcr考试题库及答案2025年

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR技术的主要发明人是（）

A.KaryMullis

B.JamesWatson

C.FrancisCrick

D.RosalindFranklin

答案：A

2.在PCR反应中，哪种酶起关键作用（）

A.解旋酶

B.DNA聚合酶

C.RNA聚合酶

D.限制酶

答案：B

3.PCR反应的变性温度一般为（）

A.50-60℃

B.70-80℃

C.90-95℃

D.100-105℃

答案：C

4.以下哪种不是PCR反应的基本成分（）

A.模板DNA

B.引物

C.核糖体

D.dNTPs

答案：C

5.PCR反应中引物的作用是（）

A.提供3-OH末端启动DNA合成

B.解开双链DNA

C.连接DNA片段

D.识别特定的基因序列

答案：A

6.一个标准的PCR反应循环次数通常为（）

A.10-15次

B.20-30次

C.40-50次

D.60-70次

答案：B

7.在PCR产物的检测中，常用的电泳方法是（）

A.琼脂糖凝胶电泳

B.聚丙烯酰胺凝胶电泳

C.淀粉凝胶电泳

D.尿素-聚丙烯酰胺凝胶电泳

答案：A

8.对于长片段DNA的PCR扩增，以下哪种措施可能有帮助（）

A.提高退火温度

B.延长延伸时间

C.减少引物浓度

D.增加循环次数

答案：B

9.如果PCR反应没有得到预期的产物，以下哪种原因不太可能（）

A.引物设计错误

B.模板DNA量过多

C.酶失活

D.反应体系中有抑制剂

答案：B

10.在实时荧光定量PCR中，哪种荧光信号检测方式是基于DNA双链结合的原理（）

A.SYBRGreen法

B.TaqMan探针法

C.分子信标法

D.荧光共振能量转移法

答案：A

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR技术的应用领域包括（）

A.基因克隆

B.遗传病诊断

C.法医鉴定

D.病毒检测

答案：ABCD

2.影响PCR反应特异性的因素有（）

A.引物特异性

B.退火温度

C.模板纯度

D.酶的种类

答案：ABC

3.以下哪些是PCR反应体系优化时需要考虑的参数（）

A.Mg2+浓度

B.引物浓度

C.dNTP浓度

D.模板量

答案：ABCD

4.在PCR产物的克隆过程中，可能用到的酶有（）

A.限制性内切酶

B.T4DNA连接酶

C.DNA聚合酶

D.反转录酶

答案：AB

5.实时荧光定量PCR的优点包括（）

A.定量准确

B.灵敏度高

C.可检测低拷贝数基因

D.不需要电泳检测

答案：ABCD

6.对于PCR引物设计，以下哪些原则是正确的（）

A.长度15-30bp

B.G+C含量40%-60%

C.避免引物自身二级结构

D.引物间避免互补

答案：ABCD

7.PCR反应中可能出现的假阳性结果原因有（）

A.引物二聚体形成

B.污染

C.非特异性扩增

D.退火温度过低

答案：BC

8.以下哪些是新型PCR技术（）

A.数字PCR

B.反向PCR

C.巢式PCR

D.不对称PCR

答案：ABCD

9.在PCR反应中，dNTP的作用包括（）

A.提供合成DNA的原料

B.参与DNA链的延伸

C.调节反应体系的pH

D.稳定酶的活性

答案：AB

10.以下关于PCR的描述正确的是（）

A.可以在体外快速扩增DNA片段

B.需要一对引物

C.是一种酶促反应

D.反应产物呈指数增长

答案：ABCD

三、判断题（每题2分，共10题）

1.PCR反应只能扩增双链DNA。（）

答案：错误

2.引物的3端可以进行修饰，不影响PCR反应。（）

答案：错误

3.提高PCR反应的退火温度一定会提高特异性。（）

答案：错误

4.所有的DNA聚合酶都可以用于PCR反应。（）

答案：错误

5.PCR产物的大小只取决于模板DNA的长