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3.確定DNA順序中基因的位置A通過對全長cDNA序列的測序、對比，以及與基因組DNA的比較，確定基因所在的區域；B通過物種已建立遺傳圖和物理圖來確定基因的位置；4.實驗確認基因功能4.1基因剔除(knock-out)最簡便的基因失活的方法.主要原理:在一段無關DNA片段的兩測連接與代換基因兩測相同的順序,將這一構建導入目的細胞,由於同源片段之間的重組,可使無關片段取代靶基因,整合到染色體中.為了便於篩選,用於取代的外源DNA中含有報告基因.tk胸苷激酶標記基因←gangcyclovirneor新黴素抗性基因→
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