定性方法俞建君68课件.pptxVIP

定性方法俞建君常州工程职业技术学院

目的：确定试样的组成，即确定每个色谱峰各代表何种组分依据：在一定固定相和一定操作条件下，每种物质都有各自确定的保留值或确定的色谱数据，并且不受其它组分的影响。也就是说，保留值具有特征性。注意：但在同一色谱条件下，不同物质也可能具有相似或相同的保留值，即保留值并非是专属的。所以：对于一个完全未知的混合样品单靠色谱法定性比较困难，往往需要采用多种方法综合解决，例如与质谱仪、红外光谱仪等联用。定性分析

利用已知标准样品定性利用检测器的选择性定性利用紫外检测器全波长扫描功能定性此外，利用二极管阵列检测器得到的包括有色谱信号、时间、波长的三维色谱光谱图，其定性结果与传统方法相比具有更大的优势。IIIIIIHPLC定性方法

检测系统利用保留时间定性利用已知标准样品定性由于每一种化合物在特定的色谱条件下（流动相组成、色谱柱、柱温等相同），其保留值具有特征性，因此可以利用保留值进行定性。

检测系统加入标准物增加峰高的方法利用已知标准样品定性在得到未知样品的色谱图后，在未知样品中加入一定量的已知标准物质，然后在同样的色谱条件下，作已知标准物质的未知样品的色谱图。对比这两张色谱图，哪个峰增高了，则说明该峰就是加入的已知纯物质的色谱峰。

检测系统用相对保留值定性利用已知标准样品定性相对保留值是在相同色谱操作条件下，组分与参比组分的调整保留值之比。相对保留值只受柱温和固定相性质的影响，而柱长、固定相的填充情况均不影响相对保留值（??_(??,??)）的大小。所以在柱温和固定相一定时，相对保留值为一定值，用它来定性可得到较可靠的结果。

检测系统同一种检测器对不同种类的化合物的响应值是不同的，而不同的检测器对同一种化合物的响应也是不同的。所以当某一被测化合物同时被两种或两种以上检测器检测时，两检测器或几个检测器对被测化合物检测灵敏度比值是与被测化合物的性质密切相关的，可以用来对被测化合物进行定性分析，这就是双检测器定性体系的基本原理。利用检测器的选择性定性在液相色谱中最常用于定性鉴定工作的双检测体系是紫外检测器（UV）和荧光检测器（FL）。下图是UV和FL串联检测食物中有毒胺类化合物的色谱图。

检测系统紫外检测器是液相色谱中使用最广泛的一种检测器。全波长扫描紫外检测器可以根据被检测化合物的紫外光谱图提供一些有价值的定性信息。传统的方法是：在色谱图上某组分的色谱峰出现极大值，即最高浓度时，通过停泵等手段，使组分在检测池中滞留，然后对检测池中的组分进行全波长扫描，得到该组分的紫外-可见光谱图；再取可能的标准样品按同样方法处理。对比两者光谱图即能鉴别出该组分与标准样品是否相同。对于某些有特殊紫外光谱图的化合物，也可以通过对照标准谱图的方法来识别化合物。利用已知标准样品定性

二极管阵列检测器就相当于n个紫外检测器并联，它既能得到化合物的色谱图，也能得到三维紫外可见光谱图，通过软件，可以判断色谱峰的纯度。所以在样品的定性方面有很大的优势。利用二极管阵列检测器定性