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研究室考试试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.以下哪种仪器用于细胞计数？

A.天平B.显微镜C.离心机

答案：B

2.实验室常用的灭菌方法是？

A.煮沸B.紫外线C.高压蒸汽

答案：C

3.PCR技术的创始人是？

A.克里克B.穆利斯C.沃森

答案：B

4.以下哪种试剂用于蛋白质定量？

A.考马斯亮蓝B.伊红C.苏木精

答案：A

5.进行SDS实验时，样品处理需加入？

A.乙醇B.上样缓冲液C.乙酸

答案：B

6.以下属于限制性内切酶的是？

A.Taq酶B.EcoRIC.DNA连接酶

答案：B

7.细胞培养常用的培养基是？

A.LB培养基B.牛肉膏蛋白胨培养基C.DMEM培养基

答案：C

8.提取DNA时，常用的沉淀剂是？

A.异丙醇B.丙酮C.氯仿

答案：A

9.酶标仪主要检测？

A.吸光度B.荧光强度C.电位

答案：A

10.以下哪种物质可作为核酸电泳的指示剂？

A.溴酚蓝B.酚酞C.甲基橙

答案：A

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.实验室常用的玻璃仪器有？

A.烧杯B.锥形瓶C.量筒

答案：ABC

2.以下属于分子生物学技术的有？

A.WesternblotB.SouthernblotC.Northernblot

答案：ABC

3.细胞培养需要的条件有？

A.合适温度B.气体环境C.营养物质

答案：ABC

4.用于DNA提取的方法有？

A.酚氯仿抽提法B.试剂盒法C.盐析法

答案：ABC

5.实验室安全防护措施包括？

A.戴手套B.穿实验服C.戴护目镜

答案：ABC

6.蛋白质分离纯化的方法有？

A.离子交换层析B.凝胶过滤层析C.亲和层析

答案：ABC

7.以下哪些是常用的缓冲液？

A.Tris-HClB.PBSC.柠檬酸缓冲液

答案：ABC

8.基因克隆的基本步骤包括？

A.目的基因获取B.载体构建C.转化与筛选

答案：ABC

9.微生物培养常用的接种方法有？

A.平板划线法B.稀释涂布平板法C.穿刺接种法

答案：ABC

10.以下哪些因素会影响酶活性？

A.温度B.pH值C.底物浓度

答案：ABC

三、判断题（每题2分，共10题）

1.所有实验废弃物都可随意丢弃。（×）

2.显微镜使用后需将物镜转至最低倍。（√）

3.高温灭菌后的物品可长期保存无菌状态。（×）

4.SDS可根据蛋白质分子量大小分离蛋白质。（√）

5.细胞培养过程中，培养基无需定期更换。（×）

6.提取RNA时要注意防止RNase污染。（√）

7.移液器使用完后无需调回最大量程。（×）

8.革兰氏阳性菌和阴性菌细胞壁结构相同。（×）

9.荧光定量PCR可对基因表达量进行定量分析。（√）

10.实验结束后不需要清理实验台面。（×）

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述实验室常用的灭菌方法及适用范围。

答案：高压蒸汽灭菌，适用于耐高温、耐湿物品，如培养基、玻璃器皿等；干热灭菌，用于耐高温玻璃和金属器械；紫外线灭菌，用于空气及物体表面消毒；化学药剂灭菌，用于不耐热物品或局部环境消毒。

2.简述蛋白质定量的常用方法及其原理。

答案：考马斯亮蓝法，其原理是考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合后颜色由棕红色变为蓝色，在一定范围内，颜色深浅与蛋白质浓度成正比，通过比色测定蛋白质含量。

3.简述细胞培养的基本流程。

答案：准备培养基、血清等试剂，配置合适培养液；对培养瓶等器材灭菌；获取细胞，接种到培养瓶；放入培养箱，保持合适温度、气体环境等；定期观察、换液；细胞传代或冻存。

4.简述PCR技术的基本步骤。

答案：变性，94-95℃使模板DNA双链解开；退火，55-65℃引物与模板DNA单链互补结合；延伸，72℃在Taq酶作用下合成新的DNA链。经多轮循环扩增目的DNA片段。

五、讨论题（每题5分，共4题）

1.讨论在实验室中如何避免交叉污染。

答案：实验器材专用且定期清洁灭菌；不同样本分区操作；移液器吸头及时更换；试剂单独分装使用；实验台面随时清洁消毒；人员操作时注意手部卫生和规范。

2.讨论蛋白质纯化过程中可能遇到的问题及解决方法。

答案：问题如纯度不高，可优化层析条件、增加纯化步骤；回收率低，可能是结合洗脱条件不佳，调整缓冲液pH、离子强度等；蛋白质变性，注