BrukerInVivoXtreme小动物活体成像系统标准操作规程.docVIP

BrukerIn-VivoXtreme小动物活体成像系统标准操作规程

【目】经过制订本操作规程,规范小动物活体成像系统使用。

【准备】

试验试剂（药品、染料、麻醉剂、水、脱毛膏等）;

试验对象（小鼠、大鼠、黑鼠、裸鼠等）;

如需要气体麻醉则要进行氧气准备,将麻醉剂倒入麻醉机中,并检验麻醉机检验窗中液位位于“min”和“Max”之间;气体麻醉前依据室内温度情况酌情打开动物空气加热器。

【开机】

主机部分:

1、打开X-Ray光源,将开关钥匙打到“ON”位置;

2、打开主机,将主机右后方电源开关打到“ON”位置。接着打开电脑,等候网线图标出现一个黄色三角叹号后,将MI软件打开。

注意:仪器开机以后,需要大约20分钟预冷时间。

隶属部分:

如需要进行气体麻醉,则需要打开麻醉机,并对试验对象进行预麻醉;

假如需要进行三维旋转拍摄,则需准备动物旋转系统（MARS）,动物旋转系统准备需要在不开拍摄软件和MARS控制器按钮打到manual情况下,先按要求将旋转器安装到暗箱中,然后将按钮打到auto,完成以后即可打开MI软件

【拍照】

1、将试验对象摆放到托盘中,拍照部位朝下,如拍摄腹部影像,需将试验对象腹部朝下,并将四肢伸展开,然后将托盘放入暗箱拍摄位置,放置是托盘缺口朝右侧摆放;

2、双击桌面MI图标,打开MI软件,单击“Capture”按钮,打开拍摄参数设置界面;

1）:拍摄界面顶部显示仪器型号。MI软件提供同时拍摄两张图像功效,即第一张图像是Foreground,主图像,第二张图像是Background,背景图像。点击Foreground和Background按钮进行切换,对两张图像拍摄程序分别进行编辑。

2）:左边第一部分File里能够实施和创建、编辑修改一个Protocol,同时,Protocol还能够经过点击软件顶部工具栏中Protocol按钮打开。

3）:第二部分是选择拍摄模式,共有5种,分别为Fluorescence荧光,Luminescence化学发光,Radioisotopix同位素,X-RayX光,Reflectance反射光,另外能够Custom定制程序。

点击Setting下拉菜单,能够选择我们已经设定好拍摄程序,或者选择DefaultSession默认设置,和CurrentSession来新建一个拍摄程序。每个拍摄模式都有一个默认设置,具体拍摄条件以下（InVivoXtremeENG,42页）:

右边save保留程序,saveas另存为和重命名,Delete删除程序。点击Unlock和Lock键,能够对锁定程序解锁或为锁定程序设置密码锁定。

在Annotation框中输入文字,能够对该程序拍摄图片进行至多48个字符注释。

在AccumulationPath栏里选择图像保留路径。

4）:第三部分是选择或者不选背景图像,BackgroundImage下拉菜单里能够不选背景图像或者选择某个拍摄程序生成背景图像。软件预设了一个标准X光拍摄程序,一个高分辨率X光拍摄程序和一个反射光拍摄程序,具体拍摄条件能够在Background中查看。假如我们在Background中编辑保留了自己程序,在这里也能够选择。

5）:第四部分中能够查看设备IP地址,相机序列号和CCD是否已经准备好,假如方块变成绿色就表示CCD已经降到预设温度,仪器已经能够正常使用。

6）:右边第一部分是光源设定,在光源下拉菜单中,生物发光和同位素拍摄选择Luminescence,反射光拍摄选择ReflectanceRGB,荧光和白光拍摄选择Muti-wavelength,X光拍摄选择X-ray。

在ApplyReferenceFile中选择是否应用校正文件,None是不应用校正文件,Auto是当已经设置了适宜校正文件时,软件自动选择匹配校正文件,选择Manual后优异行正常图像拍摄,拍完后移除样品和托盘,再进行校正文件拍摄。

为了确保图像质量,通常包含到利用光源试验,比如荧光,白光,反射光和X光成像,都必需设置适宜校正文件。荧光、白光和反射光校正文件跟光圈大小、成像视野、焦距和激发发射波长相关;X光校正文件跟光圈大小、成像视野、焦距和铝膜相关;当改变拍摄程序中以上参数时,必需重新拍摄和设置校正文件。以下是校正文件推荐参数设置:

当选择多重曝光时,应用FinaAccumulation最终只生成一张图片,AllAccumulations每次曝光最终止果都是与之前图片叠加后结果,保留每次曝光所产生图片,但在软