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pcr上岗证考试题及答案2025

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR技术的基本原理是（）

A.基因重组

B.核酸杂交

C.核酸复制

D.蛋白质合成

答案：C

2.以下哪种酶是PCR反应中必需的（）

A.解旋酶

B.RNA聚合酶

C.TaqDNA聚合酶

D.逆转录酶

答案：C

3.PCR反应中，引物的作用是（）

A.提供模板

B.催化反应

C.与模板链结合，起始DNA合成

D.提供能量

答案：C

4.在PCR反应中，变性温度一般为（）

A.50-60℃

B.70-80℃

C.90-95℃

D.100-110℃

答案：C

5.PCR反应体系中，dNTP的作用是（）

A.构建模板

B.提供碱基原料

C.稳定反应体系

D.调节pH

答案：B

6.以下哪种物质可能抑制PCR反应（）

A.镁离子

B.乙二胺四乙酸（EDTA）

C.氯化钠

D.氯化钾

答案：B

7.对于一个成功的PCR反应，退火温度通常（）

A.高于引物的Tm值

B.低于引物的Tm值

C.等于引物的Tm值

D.与引物的Tm值无关

答案：B

8.PCR产物的特异性主要取决于（）

A.模板的纯度

B.引物的特异性

C.反应温度

D.反应时间

答案：B

9.实时荧光定量PCR主要用于（）

A.基因克隆

B.检测基因表达量

C.构建基因文库

D.基因编辑

答案：B

10.PCR技术中，循环次数一般为（）

A.10-15次

B.15-20次

C.20-30次

D.30-40次

答案：C

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR反应的要素包括（）

A.模板

B.引物

C.酶

D.dNTP

E.缓冲液

答案：ABCDE

2.以下哪些情况可能导致PCR假阳性结果（）

A.污染的引物

B.污染的模板

C.交叉污染

D.反应体系中酶活性过高

E.退火温度过低

答案：ABC

3.影响PCR反应效率的因素有（）

A.引物浓度

B.模板浓度

C.酶的活性

D.镁离子浓度

E.反应温度

答案：ABCDE

4.在设计PCR引物时，需要考虑的因素有（）

A.引物长度

B.引物的GC含量

C.引物的特异性

D.引物的退火温度

E.引物的溶解性

答案：ABCD

5.下列关于TaqDNA聚合酶的特性，正确的有（）

A.热稳定性好

B.缺乏3-5外切酶活性

C.催化效率高

D.依赖模板合成DNA

E.对dNTP有特异性要求

答案：ABCDE

6.PCR技术在以下哪些领域有应用（）

A.医学诊断

B.法医鉴定

C.基因工程

D.农业检测

E.环境监测

答案：ABCDE

7.以下属于PCR反应优化的方法有（）

A.调整引物浓度

B.改变镁离子浓度

C.优化退火温度

D.更换酶的种类

E.增加循环次数

答案：ABCD

8.为防止PCR污染，可采取的措施有（）

A.严格分区操作

B.使用一次性耗材

C.定期对仪器设备清洁消毒

D.合理设计引物

E.提高反应温度

答案：ABC

9.实时荧光定量PCR的检测方法包括（）

A.染料法

B.探针法

C.杂交法

D.免疫学法

E.电泳法

答案：AB

10.在PCR产物分析中，常用的方法有（）

A.琼脂糖凝胶电泳

B.聚丙烯酰胺凝胶电泳

C.测序

D.酶切分析

E.杂交分析

答案：ABCDE

三、判断题（每题2分，共10题）

1.PCR反应中不需要模板也能进行扩增。（）

答案：错误

2.引物越长，PCR反应的特异性越高。（）

答案：错误

3.TaqDNA聚合酶具有3-5外切酶活性。（）

答案：错误

4.提高退火温度一定能提高PCR反应的特异性。（）

答案：错误

5.PCR反应中，dNTP的浓度越高越好。（）

答案：错误

6.只要有PCR仪，就可以进行任何样本的PCR检测。（）

答案：错误

7.实时荧光定量PCR只能检测DNA。（）

答案：错误

8.在PCR反应体系中，缓冲液的主要作用是维持pH值。（）

答案：正确

9.引物设计时，两条引物的Tm值相差越大越好。（）

答案：错误

10.所有的DNA聚合酶都可以用于PCR反应。（）

答案：错误

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述PCR反应的基本步骤。

答案：PCR反应基本步骤为变性、退火和延伸。变性是将模板DNA加热至90-95℃，使双链解开；退火是降温至引物的Tm值以下，引物与模板链结合；延伸是在Ta