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2022pcr考试试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR反应中，延伸温度一般是（）

A.55℃B.72℃C.94℃D.80℃

2.PCR技术的发明人是（）

A.孟德尔B.桑格C.穆利斯D.克里克

3.以下哪种物质不是PCR反应必需的（）

A.dNTPB.引物C.限制性内切酶D.Taq酶

4.引物设计时，其长度一般为（）

A.10-15bpB.15-30bpC.30-50bpD.50-100bp

5.PCR反应的基本步骤不包括（）

A.变性B.退火C.连接D.延伸

6.Taq酶具有（）

A.5→3聚合酶活性B.3→5外切酶活性

C.5→3外切酶活性D.A和C

7.进行PCR反应的仪器是（）

A.离心机B.移液器C.基因扩增仪D.酶标仪

8.提高PCR反应特异性的方法不包括（）

A.优化引物设计B.降低退火温度

C.使用热启动Taq酶D.调整Mg2+浓度

9.PCR反应体系中，Mg2+的主要作用是（）

A.维持体系pHB.激活Taq酶

C.作为缓冲剂D.提供能量

10.以下哪种模板不能用于PCR反应（）

A.基因组DNAB.RNAC.cDNAD.质粒DNA

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR反应体系包含（）

A.模板DNAB.引物C.dNTPD.Taq酶E.缓冲液

2.引物设计的原则包括（）

A.长度适宜B.GC含量合适C.避免形成引物二聚体

D.与模板特异性结合E.5端可添加修饰

3.影响PCR反应的因素有（）

A.模板质量B.引物浓度C.酶量D.循环次数E.反应温度

4.PCR技术的应用领域有（）

A.基因诊断B.基因克隆C.法医鉴定D.物种鉴定E.肿瘤研究

5.以下属于热稳定DNA聚合酶的有（）

A.Taq酶B.Pfu酶C.Klenow片段D.Vent酶E.T4DNA聚合酶

6.PCR产物的分析方法有（）

A.琼脂糖凝胶电泳B.聚丙烯酰胺凝胶电泳

C.测序D.酶切分析E.斑点杂交

7.热启动PCR的优点包括（）

A.提高特异性B.减少非特异性扩增

C.提高灵敏度D.缩短反应时间E.降低成本

8.设计引物时，需要考虑的因素有（）

A.引物的Tm值B.引物的碱基组成

C.引物与模板的错配情况D.引物的3端稳定性

E.引物的5端修饰

9.以下哪些可以作为PCR的模板（）

A.病毒核酸B.线粒体DNAC.叶绿体DNA

D.人工合成的寡核苷酸E.总RNA逆转录合成的cDNA

10.PCR反应中，循环参数包括（）

A.变性温度B.变性时间C.退火温度

D.退火时间E.延伸时间

三、判断题（每题2分，共10题）

1.PCR反应中，退火温度越高，特异性越强。（）

2.Taq酶没有3→5外切酶活性，所以PCR产物准确性相对较低。（）

3.引物浓度越高，PCR反应效果越好。（）

4.只要有引物和模板，PCR反应就能正常进行。（）

5.PCR技术只能扩增双链DNA模板。（）

6.热启动PCR是在反应开始时就加入Taq酶。（）

7.引物二聚体的形成会影响PCR反应的特异性。（）

8.循环次数越多，PCR产物的量一定越多。（）

9.进行PCR反应时，模板DNA的量越多越好。（）

10.不同的热稳定DNA聚合酶具有相同的特性。（）

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述PCR技术的基本原理。

答：PCR基于DNA半保留复制原理，通过高温变性使模板DNA双链解开，低温退火让引物与模板结合，适温延伸在Taq酶作用下以dNTP为原料合成新的DNA链，经多次循环扩增特定DNA片段。

2.简述引物设计的要点。

答：要点包括长度15-30bp，GC含量