3.1.1重组DNA技术的基本工具 课件（共44张PPT2个视频） 人教版（2019）高中生物学选择性必修3.pptxVIP

第1节重组DNA技术的基本工具;复习提问;我国是棉花的生产和消费大国，棉花在种植过程中常常会受到棉铃虫的侵袭，这会使棉花大量减产。大量施用农药不仅提高了生产成本，还可能造成农产品和环境的污染。普通棉花不抗虫，苏云金杆菌有一种“抗虫基因”，能表达出抗虫蛋白来杀死棉铃虫。

;普通棉花;5;P67;“分子手术刀”;模拟从DNA分子中剪取所需的目的基因;基因工程的分子工具（一）

限制性内切核酸酶——“分子手术刀”;1、别称：

2、来源：;原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵，所以它在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制。限制酶是细胞的一种防御性工具。当原核细胞遭到外源DNA入侵时，它会利用限制酶来切割外源DNA，使之失效。;例、EcoRI酶切示意图;识别双链DNA分子的特定核苷酸序列特征：两条链从5`→3`的碱基顺序相同。;回文诗《万柳堤即景》;例、EcoRI酶切示意图;例1、据下图分别写出BglⅡ与BamHⅠ酶切后形成的黏性末端为、。;例2、判断两个黏性末端是否为同一种限制酶切割产生;1、别称：

2、来源：;p75;基因工程的分子工具（二）

DNA连接酶——“分子缝合针”;（二）DNA连接酶——“分子缝合针”;1、作用：;分析1：黏性末端和平末端的连接效率有差异原因是什么？;【回顾】;【比较】DNA聚合酶与DNA连接酶;【笔记】DNA聚合酶与DNA连接酶;名称;基因工程的分子工具（三）

基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”;为什么需要载体？直接将目的基因导入受体细胞可以吗？;1、作用：;（1）常用载体：质粒;质粒;;;【小结】载体需要具备的条件（以质粒为例）;深度思考：使用DNA连接酶后是否一定能将目的基因与载体成功连接？尝试分析影响连接的因素。;笔记：连接失败的原因：

①末端不匹配、②酶失活、③温度不当（通常需16°C）、

④载体环化、⑤质粒环化、

⑥目的基因与质粒反向连接，造成目的基因不能正确表达。;双酶切;笔记：连接失败的原因：

①末端不匹配、

②酶失活、

③温度不当（通常需16°C）、

④载体环化、

⑤质粒环化、

⑥目的基因与质粒反向连接，

造成目的基因不能正确表达。;P73;根据图中的相关信??找到两条片段上EcoRI的识别序列和切割位点。然后，用剪刀进行“切割”。待切割位点全部切开后，将从下面那条DNA链上切下的片段重组到上面那条DNA链的切口处，并用透明胶条将切口粘连起来。;讨论2：你制作的黏性末端的碱基能不能互补配对？如果不能，可能是

什么原因造成的？;【小结】基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”;【总结】