色谱基础培训自己整理实用.pptVIP

归一化法（NORM）第30页，共51页，星期日，2025年，2月5日外标法（ESTD）第31页，共51页，星期日，2025年，2月5日内标法（ISTD）第32页，共51页，星期日，2025年，2月5日选择内标物的标准 1.样品中不存在 2.容易得到 3.化学性质与样品相似 4.不会与样品发生反应 5.在感兴趣组分附近流出 6.与其它组分分离度良好 7.色谱性质稳定*内标与样品的浓度范围应接近第33页，共51页，星期日，2025年，2月5日第三章液相色谱分析高效液相色谱与气相色谱比较高效液相色谱仪构造（原理，维护）常见问题及维护第34页，共51页，星期日，2025年，2月5日相同：兼具分离和分析功能，均可以在线检测差别：分析对象和流动相的差别（1）分析对象差别气相色谱：能气化、热稳定性好、且沸点较低的样品；占有机物的20%高效液相色谱：不受样品挥发性和热稳定性的限制，分子量大、难气化、热稳定性差及离子型样品均可检测；占有机物的80%3.1高效液相色谱与气相色谱比较第35页，共51页，星期日，2025年，2月5日（2）流动相差别气相色谱：流动相为惰性气体组分与流动相无亲合作用力，只与固定相作用高效液相色谱：流动相为非惰性液体,种类较多，选择余地广流动相与组分间有亲合作用力，为提高柱的选择性、改善分离度增加了因素，对分离起很大作用流动相极性和pH值的选择也对分离起到重要作用选用不同比例的两种或两种以上液体作为流动相可以增大分离选择性第36页，共51页，星期日，2025年，2月5日（3）操作条件差别气相色谱：加温操作高效液相色谱：室温；高压（液体粘度大，峰展宽小）第37页，共51页，星期日，2025年，2月5日高压输液系统进样系统分离系统检测系统记录系统3.2高效液相色谱仪构造第38页，共51页，星期日，2025年，2月5日溶剂贮存器一般由玻璃、不锈钢或氟塑料制成，容量为1到2L使用色谱纯溶剂，并预先脱气高压泵输出压力高、流量范围大、流量恒定、无脉动流量精度和重复性为0.5%左右应耐腐蚀，密封性好在线脱气装置脱去流动相中的溶解气体，也可采用超声脱气流动相先经过脱气装置再输送到色谱柱脱气不好时有气泡，导致流动相流速不稳定，造成基线漂移，噪音增加（1）高压输液系统第39页，共51页，星期日，2025年，2月5日色谱基础培训自己整理实用第1页，共51页，星期日，2025年，2月5日纲要色谱法基本原理概述气相色谱原理及应用维护（数据处理）液相色谱原理及应用维护第2页，共51页，星期日，2025年，2月5日1.1色谱法的由来1906年由俄国植物学家Tsweet创立植物色素分离固定相——CaCO3颗粒流动相——石油醚色谱柱：玻璃管第一章色谱法概述第3页，共51页，星期日，2025年，2月5日1.2分离过程示意图通过气相色谱分离壬烷和癸烷样品流动相固定相第4页，共51页，星期日，2025年，2月5日1.3色谱法定义、实质和目的

定义：利用物质的物理化学性质建立的分离、分析方法实质：分离目的：定性分析或定量分析第5页，共51页，星期日，2025年，2月5日按两相分子的聚集状态分类：流动相固定相类型液相色谱液体固体液-固色谱液体液体液-液色谱气体固体气-固色谱气体液体气-液色谱气相色谱1.4色谱法分类

第6页，共51页，星期日，2025年，2月5日第二章气相色谱分析气相色谱仪构造气路系统进样系统色谱柱系统检测器系统数据处理系统第7页，共51页，星期日，2025年，2月5日气相色谱仪构造第8页，共51页，星期日，2025年，2月5日（1）对载气的要求如下：惰性（不与样品或固定相反应）气体扩散小，以提高柱效率容易得到并易纯化价格便宜满足检测器要求（2）载气的作用：驱动力；提供相分配空间（3）常用载气：N2,H2,He2.1气路系统第9页，共51页，星期日，2025年，2月5日（4）气体不纯的不良影响：样品失真或消失柱失效对固定液保留特性的影响对检测器的影响（