植物脱毒快繁技术.pptVIP

*****************吸胀的种子由于含水量增加，酶活性增强，胚乳或子叶贮藏的营养物质发生分解，并合成新的、复杂的有机物以构成新细胞，使胚细胞的数目增多，体积加大，当胚的体积大到一定程度时，胚根首先顶破种皮而出，这就是萌动（又称露白）。

种子胚根伸出后，立即向下伸入土层，固定于土壤，此时胚根已能吸收土壤水分，接着长出胚芽。当胚根的长度等于种子的长度或胚芽达到种子长度一半时即为发芽。**********三、脱毒快繁材料的选择应注意以下几点：1）品种要可靠2）要选择经当地栽培确认的高产优质的品种来作为脱毒材料3）名贵的植物良种4）植物生长旺盛期，再生率高，脱毒效果好第31页，共56页，星期日，2025年，2月5日四、植物病毒的鉴定1、外观判断法2、指示植物法3、抗血清鉴定法4、电子显微镜检查法5、酶联免疫鉴定法(ELISA)第32页，共56页，星期日，2025年，2月5日1、外观判断法：带病毒株往往叶片发黄，凹凸不平，畸形，可根据这些表现来判断。但有些病毒表现不明显，仅靠这一方法还不够。第33页，共56页，星期日，2025年，2月5日2、指示植物检测法：指示植物又称鉴别寄主，指的是对某种或某些特定病毒非常敏感，而且症状表现十分明显的植物。通常不同病毒应选用不同的植物。马铃薯病毒常用指示植物有千日红、曼陀罗、豇豆、辣椒等。分为2种①汁液感染法（摩擦接种法）②嫁接检测法第34页，共56页，星期日，2025年，2月5日3、抗血清鉴定法（抗原－抗体反应）原理：由于病毒是由蛋白质和核酸组成的，是一种较好的抗原。将病毒给动物注射后产生抗体。抗原和抗体结合产生血清反应。抗原：病毒。抗体：是指生物体在外来抗原的刺激下产生的一种免疫球蛋白，主要存在于血清中，含抗体的血清称为抗血清。4、电子显微镜检查法直接观察有无病毒存在，并根据病毒的大小、形状和结构等来判断病毒种类。第35页，共56页，星期日，2025年，2月5日5、酶联免疫吸附测定法(ELISA)enzymelinkedimmunosorbentassay把抗原-抗体的免疫反应于酶的催化反应相结合而发展起来的一种综合性技术，灵敏度高，特异性强，发展最快应用最广的方法。原理：采用酶标记的特异抗体指示抗原-抗体的结合，从而检测样品中的抗原定量测定法。第36页，共56页，星期日，2025年，2月5日双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法，操作步骤如下：(1)将特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体：洗涤除去未结合的抗体及杂质。(2)加受检标本：使之与固相抗体接触反应一段时间，让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合，形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。(3)加酶标抗体：使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检物质的量正相关。(4)加底物：夹心式复合物中的酶催化底物成为有色产物。根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量。第37页，共56页，星期日，2025年，2月5日第38页，共56页，星期日，2025年，2月5日五、快速繁殖茎尖培养得到的脱毒苗不多，用于生产需扩大繁殖。扩繁方法：1）组培快繁2）无毒苗栽到土壤中进行扩繁。如甘薯、草莓等利用蔓，马铃薯、姜、蒜等利用地下部分繁殖。为了预防病毒再感染，扩繁应在培育温室或防虫罩内，因为昆虫传播病毒。3）两种方法相结合，试管内扩繁，移栽后再扩繁。第39页，共56页，星期日，2025年，2月5日注意：1、培养变异的产生，应及时去除2、脱毒苗并非永远是无毒苗，由于昆虫等的传播，不免会再感染病毒，所以要经常脱毒，一般脱毒苗用1－3代。脱毒试管苗为原原种－－繁殖一代为原种－－原1代－－原2代第40页，共56页，星期日，2025年，2月5日枫树快繁图示第41页，共56页，星期日，2025年，2月5日枫树快繁图示第42页，共56页，星期日，2025年，2月5日月季快繁图示第43页，共56页，星期日，2025年，2月5日月季快繁图示第44页，共56页，星