基因工程菌株的发酵条件采用适当的操作方式可使工程菌生长率具.pptxVIP

基因工程菌株的发酵条件第五节基因工程药物的生产采用适当的操作方式可使工程菌生长率具有优势，并使工程菌和质粒丢失菌生长竞争趋于极端化。培养基温度pH溶解氧浓度接种量发酵环境的变化频率

基因工程菌株的发酵条件第五节基因工程药物的生产培养基碳源：供给微生物生命活动所需的能量和构成菌体细胞以及代谢产物的物质基础；氮源：构成微生物细胞中蛋白质和核酸的主要元素；无机盐和微量元素：构成细胞物质、酶活性中心的组成部分、维持酶活、调节渗透压、pH值等；生长因子：提供微生物细胞所需要的化学物质、辅助因子的组分、参与代谢；产物形成的诱导物、前体和促进剂；水。组成

基因工程菌株的发酵条件第五节基因工程药物的生产培养基碳源：供给微生物生命活动所需的能量和构成菌体细胞以及代谢产物的物质基础；对菌体生长和外源基因表达有较大影响。常用碳源：葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖、甘油；缓慢利用的淀粉、纤维素；实际应用时考虑：比生长速率、菌体得率、对启动子的影响、副产物的产生组成

基因工程菌株的发酵条件第五节基因工程药物的生产培养基氮源：构成微生物细胞中蛋白质和核酸的主要元素有机氮源：黄豆饼粉、花生饼粉、棉子饼粉、玉米浆、蛋白胨、酵母粉、鱼粉；无机氮源：氨水、硫酸铵、氯化铵、硝酸盐。在各种有机氮源中，酪蛋白水解物更有利于产物的合成与分泌，培养基中色氨酸对trp启动子控制的基因表达有影响。组成

基因工程菌株的发酵条件第五节基因工程药物的生产培养基无机盐和微量元素：构成细胞物质、酶活性中心的组成部分、维持酶活、调节渗透压、pH值等；低磷诱导的困惑：1）过量的无机磷会刺激葡萄糖的利用、菌体的生长和氧的消耗。2）启动子只有在低磷酸盐时才被启动。当菌体生长到一定密度，磷酸盐被消耗至较低浓度时，目的蛋白才开始表达。通常，起始的磷酸盐浓度应控制在0.015mol/L左右，浓度过低影响细菌生长，浓度过高影响外源基因表达组成

基因工程菌株的发酵条件第五节基因工程药物的生产培养基生长因子：微生物维持正常生活不可缺少、但细胞自身不能合成的某些微量有机化合物，包括维生素、氨基酸、嘌呤和嘧啶的衍生物、脂肪酸等；维生素：辅酶的组成结构，必需成分，需要量甚微，一般1～50μg/L；氨基酸：微生物自身不能合成，以游离氨基酸或小分子肽的形式供应；嘌呤、嘧啶及其衍生物：构成核酸和辅酶。组成

基因工程菌株的发酵条件第五节基因工程药物的生产培养基有血清培养基/无血清培养基优点：1）避免血清不同批次间的质量差异，提高细胞培养实验结果的一致性。2）避免血清对细胞的毒性作用和血清源性污染。3）避免血清组分对实验研究的影响。4）有利于体外培养细胞的分化。5）可提高目的蛋白的表达量并使产品易于分离纯化。6）组分稳定，可大量生产。7）不含有丝分裂原抑制剂，可以促进细胞增殖。组成

基因工程菌株的发酵条件第五节基因工程药物的生产培养基有血清培养基/无血清培养基缺点：①无血清培养基的生产成本较高，不利于商业化开发与应用；②目前低血清培养基研究开发的相关数据缺乏交流，可查阅的资料有限，不能有效促进细胞驯化技术的发展；③多数无血清培养基的应用不广泛，通用性较低，不具有普遍性；④细胞在无血清培养基中，对外界条件如物理和化学等因素的改变较敏感。组成

基因工程菌株的发酵条件第五节基因工程药物的生产培养基产物形成的诱导物、前体和促进剂诱导物：刺激因素，酶合成需要；前体：被菌体直接用于产物合成而自身结构无显著改变的物质，如合成青霉素G的苯乙酸、合成红霉素的丙酸等。当前体物质是产物合成的限制因素时，添加前体能增加产物产量，并在某种程度上控制生物合成的方向；促进剂：刺激菌株的生长，提高发酵产量，缩短发酵周期。如四环素发酵中加入溴化钠和M促进剂，能抑制金霉素的生物合成，同时增加四环素产量。组成

基因工程菌株的发酵条件第五节基因工程药物的生产培养基根据营养基来源划分天然培养基合成培养基根据培养基原物质状态液体培养基固体培养基分类

基因工程菌株的发酵条件第五节基因工程药物的生产培养基微生物在不同的培养基中进行不同的代谢活动。对基因工程菌来说，培养基组分可能通过多种途径影响质粒的稳定遗传；质粒在丰富培养基比在低限培养基中更加不稳定。合成培养基往往有利于宿主细胞的生长，但不利于外源基因的表达eg.血清、抗生素、…..影响