《微生物学教程》周德庆(第二版).pptxVIP

第3节影响微生物生长的主要因素第4节微生物培养法概论第2节微生物的生长规律第5节有害微生物的控制第1节测定生长繁殖的方法第6章微生物的生长及其控制

微生物不论在自然条件下还是在人为条件下01发生作用，都需要达到一定的数量才能实现。微生物生长的定义是指微生物个体数目的增02加，即繁殖。微生物死亡的定义是指细胞永久失去繁殖的能力。03

测生长量第1节测定生长繁殖的方法测细胞干重测细胞湿重间接法比浊法测生理指标（一）直接法

计个体数直接法用计数板在光学显微镜下直接观察并计数。

荧光染料染色：活菌为绿色，死菌为红色

比法浊平板菌落计数法浇注平板法（pourplate）12345厌氧菌的菌落计数滚管培养法（教材P168）涂布平板法（spreadplate）（二）间接计数法

微生物的个体生长和同步生长研究单细胞微生物的个体生长很困难。第2节微生物的生长规律使某一群体中的所有个体细胞尽可能都处于同样的细胞生长和分裂周期的培养方法。1、同步培养（synchronousculture）：某细胞群体中所有个体细胞处于分裂步调一致的生长状态。2、同步生长（synchronousgrowth）：

获得同步生长的方法（1）环境条件诱导法（2）机械筛选法膜洗脱法薄膜洗脱法收集的大肠杆菌在葡萄糖基础培养基中的同步生长。

单细胞微生物的典型生长曲线（同步，封闭）单细胞微生物的典型生长曲线

（一）延滞期（lagphase）培养开始最初细胞数目没有增加的一段时期。特点：生长速率常数为零，但合成代谢十分活跃。细胞形态变大或增长。细胞内RNA（尤其是rRNA）含量增高。对外界不良条件反应敏感。生长速率常数（R）：单位时间内细胞数目或细胞量的变化。

影响延滞期长短的主要因素菌种生长快的菌比生长缓慢的菌延滞期短。接种菌菌龄采用对数生长期的菌作为接种菌可缩短延滞期。12345培养基成分营养丰富，与种子培养条件接近的培养基可缩短延滞期。接种量适当提高接种量可缩短延滞期。

（二）指数期（对数生长期）（exponentialphase）紧接延滞期后细胞数目以几何级数增长的一段时期。特点：生长速率常数R最大，代时G最短。细胞进行平衡生长。酶系活跃，代谢旺盛。代时（G）：1个细胞分裂为2个所需要的时间。

影响指数期微生物代时长短的主要因素：原核比真核短，小的真核比大的真核短。营养物浓度菌种营养成分生长限制因子（growth-limitedfacter）培养温度（教材表6-1）

稳定期（stationaryphase）是在对数生长之后细胞群体进入的生长与死亡处于动态平衡的一段时期。特点：生长速率常数R=0菌体产量达到最高某些细胞开始启动一些特殊的代谢途径:形成芽孢，形成贮存颗粒，形成次级代谢产物。

稳定期到来的原因：营养物质的耗尽。营养物比例失调。有害代谢产物的积累。pH、氧化还原势等条件越来越不适宜。

衰亡期（declinephase,deathphase）整个群体生长速率R为负值的时期。特点：1个体死亡速度超过新生速度，R为负值。2细胞形态发生多形化。3细胞开始自溶。4产生衰亡期的主要原因：环境对继续生长越来越不利。5

三、微生物的连续培养连续培养的目的长时间地保持微生物的对数生长状态以提高经济效益。连续培养的方式恒浊器恒化器单级多级单级多级

利：高效节约，自控，产品质量稳定连续培养的利弊批培养。连续培养时间是有限制的自学教材P159-160弊：菌种易退化，易污染，营养物利用率低于单010203040506四、微生物的高密度培养

第3节影响微生物生长的主要因素01影响微生物生长的因素很多，但主要的因素有4个：水分、温度、氧气和pH值。02

一、水分对微生物生长的影响水活度水活度（wateractivity，aw）：它表示在天然或人工环境中，微生物可实际利用的自由水或游离水的含量。aw=PP0（教材P93）农业土壤中的aw一般在0.9—1之间。

细菌酵母菌霉菌嗜盐菌：0.75（约5.5MNaCl）一般：0.90—0.98耐旱菌：0.65—0.75双孢旱霉：0.60一般：0.80—0.87高渗酵母：0.61—0.65鲁氏酵母：0.60生长最低aw一般：0.87—0.91

调剂溶质（compatiblesolutes）01生活在水活度低（渗透压高）的环境中的微生物02如何获得水分（细胞处于正态水平衡positivewater03balance）？04靠提高细胞内部溶质的浓度：05泵入无机离子06