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GPCR124信号通路在细胞衰老过程中的调控机制研究

目录

文档概括．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.1.1细胞衰老的生物学定义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

1.1.2细胞衰老的普遍性与危害．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

1.1.3G蛋白偶联受体家族概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11

1.2GPCR124受体概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12

1.2.1GPCR124的结构特征．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13

1.2.2GPCR124的表达模式．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14

1.2.3GPCR124的初步功能假说．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

1.3研究目的与内容．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

1.3.1核心研究目标．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

1.3.2主要研究内容．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19

细胞衰老相关理论与模型．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21

2.1细胞衰老的分子机制．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22

2.1.1DNA损伤与修复失衡．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26

2.1.2氧化应激积累．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

2.1.3线粒体功能障碍．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

2.1.4端粒缩短．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30

2.1.5表观遗传学改变．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31

2.2细胞衰老的检测方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33

2.2.1β半乳糖苷酶活性检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36

2.2.2端粒长度分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37

2.2.3坞缩试验．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38

2.2.4其他常用指标．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39

2.3细胞衰老模型建立．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41

2.3.1基于基因干预的衰老模型．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41

2.3.2基于药物诱导的衰老模型．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．44

GPCR124信号通路研究方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．46

3.1细胞培养技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．46

3.2基因表达调控技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．48

3.2.1基因过表达技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．49

3.2.2基因沉默技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．51

3.3信号通路检测技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．53

3.3.1蛋白质印迹分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．54

3.3.2细胞定位分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．55

3.3.3磷酸化水平检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．56

3.3.4基底膜通透性检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．