DBS13 009-2017 食品安全地方标准 小麦粉中偶氮甲酰胺的测定—高效液相色谱法.docxVIP

DBS13

河北省地方标准

DBS13/009—2017

食品安全地方标准

小麦粉中偶氮甲酰胺的测定

——高效液相色谱法

2017-11-08发布2018-02-01实施

河北省卫生和计划生育委员会发布

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DBS13/009—2017

前言

本标准按照GB/T1.1-2009规定的格式编写。

本标准由河北省卫生和计划生育委员会归口。

本标准于2017年11月8日首次发布。

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食品安全地方标准

小麦粉中偶氮甲酰胺的测定—高效液相色谱法

1范围

本标准规定了小麦粉中偶氮甲酰胺的高效液相色谱测定方法。

本标准适用于小麦粉中偶氮甲酰胺含量的检测。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本适用于本标准。

GB/T5009.1食品卫生检验方法理化部分总则

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。

3原理

样品中的偶氮甲酰胺用丙酮进行提取，经浓缩、脱脂、过滤后，高效液相色谱法测定，外标法定量。

4试剂和材料

除另有规定外，试剂均为分析纯，实验用水符合GB/T6682一级水要求。

4.1乙腈：色谱纯。

4.2丙酮：色谱纯。

4.3正己烷：色谱纯。

4.4磷酸。

4.5磷酸氢二钾（K2HPO4·3H2O）。

4.6辛烷磺酸钠。

4.7标准品：偶氮甲酰胺（C2H6N6O2，CAS号：123-77-3）纯度大于或等于99%。

4.8色谱柱1：C18柱，柱长250mm，内径4.6mm，粒径5μm，或相当者。

4.9色谱柱2：氰基（CN）柱，柱长250mm，内径4.6mm，粒径5μm，或相当者。

4.1010mmol/L辛烷磺酸钠-5mmol/L磷酸氢二钾溶液：称取1.08g辛烷磺酸钠（4.6），0.57g磷酸氢二钾（4.5）加水溶解并定容至500mL，用磷酸（4.4）溶液调节pH至3.5。

4.115mmol/L磷酸氢二钾溶液：称取0.57g磷酸氢二钾（4.5）加水溶解并定容至500mL。

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4.12标准储备液：准确称取适量偶氮甲酰胺标准品（4.7），用5mmol/L磷酸氢二钾溶液（4.11）或水溶解并配制成含偶氮甲酰胺100mg/L的标准储备液，现用现配。

注：使用色谱柱1用5mmol/L磷酸氢二钾溶液（4.11）溶解，使用色谱柱2用水溶解。以下标准工作液和样品液的定容溶剂与本条相同。

4.13基质标准工作液：准确移取一定体积的标准储备溶液（4.12），用空白样品处理液稀释成浓度适当的标准工作液，现用现配。

4.14微孔滤膜：0.45μm，水系。

5仪器和设备

5.1高效液相色谱仪：配有紫外检测器或二极管阵列检测器。

5.2高速离心机。

5.3超声波振荡器。

5.4旋转蒸发仪。

%.1涡旋混合器。

5.5离心管。

5.6分析天平：感量分别为0.01g和0.1mg。

6分析步骤

6.1样品制备

试验前应将获取的样品充分混匀，样品制备方法按GB/T5009.1执行。

6.2样品处理

称取小麦粉样品2g（精确至0.01g）于50mL具塞离心管中，加入15mL丙酮（4.2）超声振荡提取15min，在7000r/min下离心5min，将上清液转移至50mL浓缩瓶中，再用10mL丙酮重复提取一次，合并提取液于浓缩瓶中，于常温下减压浓缩至干。残渣用2mL

5mmol/L磷酸氢二钾溶液（4.11）或水超声涡旋5min复溶。再加入3mL正己烷（4.3）脱脂，静置分层后，取下层溶液过0.45μm水系微孔滤膜（4.14），滤液供高效液相色谱仪分析。

6.3高效液相色谱参考条件

色谱条件可以参照以下用于任何一种色谱柱的测定。

6.2.1用于色谱柱1测定的条件

a)色谱柱：C18柱，柱长250mm，内径4.6mm，粒径5μm，或相当者；

b)流动相：10mmol/L辛烷磺酸钠-5mmol/L磷酸氢二钾溶液（A）（4.10）-乙腈（B）：80+20，v+v；

c)流速：0.5mL/min；

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d)检测波长：245nm；

e)进样量：20μL；

f)柱温