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目录
第1章绪论1
1.1锰和铁的研究进展1
1.1.1锰和铁的危害1
1.1.2植物对锰和铁的吸收及转运2
1.2紫花苜蓿重金属相关研究进展3
1.3NRAMP基因家族4
1.3.1NRAMP基因研究概况4
1.3.2NRAMP基因与金属转运4
1.4本研究的目的意义及技术路线7
1.4.1本研究的目的意义7
1.4.2本研究的技术路线7
第2章胁迫条件下紫花苜蓿MsNRAMP2基因表达量分析8
2.1引言8
2.2实验材料9
2.2.1植物材料9
2.2.2实验仪器及药品9
2.3实验方法9
2.3.1植物材料的处理9
2.3.2紫花苜蓿RNA提取9
2.3.3实时荧光定量PCR10
2.3.4数据处理10
2.4实验结果11
2.4.1紫花苜蓿在高锰、高铁处理下的表型11
2.4.2MsNRAMP2基因在高锰、高铁和激素处理下相对表达量11
2.5本章讨论13
2.6本章小结15
第3章MsNRAMP2基因启动子转化及GUS组织化学染色分析.16
3.1引言16
3.2实验材料16
3.2.1植物材料16
3.2.2实验药品16
3.3实验方法16
3.3.1pCAMBIA1301-MsNRAMP2pro::GUS转化农杆菌16
3.3.2植物的遗传转化17
3.3.3GUS组织化学染色18
3.4实验结果18
3.4.1pCAMBIA1301-MsNRAMP2pro::GUS导入农杆菌18
3.4.2MsNRAMP2基因启动子转化植物18
3.4.3GUS组织化学染色19
3.5本章讨论20
3.6本章小结21
第4章pBI121-MsNRAMP2-GFP载体的构建及亚细胞定位23
4.1引言23
4.2实验材料23
4.2.1植物材料23
4.2.2质粒载体和菌株23
4.2.3实验仪器及药品23
4.3实验方法24
4.3.1构建pBI121-MsNRAMP2-GFP载体24
4.3.2pBI121-MsNRAMP2-GFP转化农杆菌26
4.3.3侵染烟草26
4.4实验结果27
4.4.1pBI121-MsNRAMP2-GFP载体的构建27
4.4.2pBI121-MsNRAMP2-GFP导入农杆菌28
4.4.3MsNRAMP2蛋白的亚细胞定位28
4.5本章讨论29
4.6本章小结30
第5章转MsNRAMP2基因植物对锰、铁胁迫的生理响应31
5.1引言31
5.2实验材料及药品31
5.2.1植物材料31
5.2.2实验仪器及药品32
5.3实验方法32
5.3.1转MsNRAMP2基因烟草的筛选32
5.3.2转MsNRAMP2基因烟草的鉴定32
5.3.3高锰、高铁胁迫转MsNRAMP2基因烟草33
5.3.4高锰、高铁胁迫转MsNRAMP2基因烟草的生理指标检测
33
5.3.5数据分析33
5.4实验结果33
5.4.1转MsNRAMP2基因T代烟草植株筛选33
2
5.4.2转MsNRAMP2基因T代烟草PCR鉴定33
2
5.4.3高锰、高铁胁迫下表型3
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