《肉与肉制品外源成分残留规范》标准（征求意见稿）.docx

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T/HNSPXHXXXX—XXXX

肉制品中动物性外源基因最大残留限量

1范围

本文件规定了肉制品中动物性外源基因的最大残留限量。

本标准适用于肉制品的动物性（猪牛羊鸡鸭）外源成分的最大残留检测，不适用于猪牛羊鸡鸭外的其他动物性成分检测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本标准必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本标准；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本标准。

GB/T34796水溶液中核酸的浓度和纯度检测紫外分光光度法

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1肉制品

以畜禽肉或其食用副产品等为主要原料，添加或者不添加辅料，经腌、卤、酱、蒸、煮、黑、烤、烘焙、干燥、油炸、成型、发酵、调制等有关生产工艺加工而成的生或熟的肉类制品。

3.2动物性外源成分

肉制品标签上未标注，即生产中所用原料肉之外的其他动物源成分。

3.3动物性内源成分

肉制品标签上标注，即生产中所用原料肉动物源成分。

4应用原则

4.1食品生产时，食品生产者、加工者应尽可能避免外源成分的带入，不允许蓄意加入产品标签之外的原料肉。

4.2样品的采集和处理及检验按照附件执行。

5要求

5.1外源成分检出率要求

T/HNSPXHXXXX—XXXX

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类别

动物性外源成分要求

检测方法

肉制品

未检出1，或相对含量≤1%2

附件1

1：成分筛查检测中未检出外源性成分（只出现动物性内源成分熔解曲线峰，未出现动物性外源成分熔解曲线峰）

2：表示被检动物源性成分占内外源动物源性成分的百分比含量。

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附件1畜禽肉产品、单一型肉制品、混合型肉制品动物性外源成分检测方法

1.原理

本方法是利用RT-PCR技术，对样品中动物源性成分定性筛查和相对定量检测。其中，源性成分筛查，通过扩增子热力学多态性设计，构建能同步特异性扩增多个具有Tm值显著差异动物源性成分的多重RT-PCR扩增体系，依据扩增后熔解曲线峰的个数和位置，可判定样品中的动物源性成分组成。相对定量，是利用动物线粒体DNA序列物种多态性和保守性共存的特点，设计物种特异性和物种通用性引物/Taqman探针组成共链参比扩增体系，依据?Ct值-百分比含量标准曲线，可测定动物源性成分的相对含量（占所有肉种成分的百分比含量）。

2.检测用引物和探针

2.1定性筛查

表1动物源性成分筛查引物

名称

序列

猪

上游引物：5’-TACTTCTACTATCCCTGCCAGTTC-3’

下游引物：5’-TGATAAAGGATAGGGTCTCCACCA-3’

牛

上游引物：5’-GTTCTTCACGACACATACTACGTT-3’

下游引物：5’-GCAAATACAGCTCCTATTGATAAA-3’

羊

上游引物：5’-AACAAAGCGCCTTAAACCAATT-3’

下游引物：5’-CCTTTTCTAGGGCAGGTTTTGT-3’

鸡

上游引物：5’-CCCTAAAAATAGACATATACTCC-3’

下游引物：5’-ATGTTATTTGCGATGGTTAGTG-3’

鸭

上游引物：5’-TCTTAACTGTCTCTCACGGAT-3’

下游引物：5’-CGAAAAATATCGGCCATGCTC-3’

内参

上游引物：5-TACGACCTCGATGTTGGATCA-3

下游引物：5-AGATAGAAACCGACCTGGAT-3

2.2相对定量

表2动物源性成分相对定量引物

名称

序列

脊椎动物通用

上游引物：5-TACGACCTCGATGTTGGATCA-3

下游引物：5-AGATAGAAACCGACCTGGAT-3

探针：5-FAM-CCGGTCTGAACTCAGATCACGTAGGA-TAMRA-3

猪

上游引物：5-ATCTGAATCAATGCAACAGTACAT-3下游引物：5-TGATAGTGAGTCGGAGAAGAATGT-3或

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5-GAACTAGTAGGGGTGCTGATAGTG-3或

5-ATTAAGGCTGTTTTCGCCTAGT-3

探针：5-FAM-TCTCCTCATTAGCCTGATCAGTCTATCCC-TAMERA-3

羊

上游引物：5-ATAATCTGAATCAACACCACACTTC-3

下游引物：5-TAGATAAGGAGTCGGAGAAAAAAGT-3

探针：5-FAM-AGCTTGCTAATCAGCCTCACAAGCC-