GmNaKR1与大豆开花促GmFT2a的互作关系研究.pdf

目录

第1章绪论1

1.1植物的成花1

1.2植物花期调控1

1.2.1光周期途径1

1.2.2春化途径2

1.2.3赤霉素途径2

1.2.4自主开花途径3

1.2.5苗龄途径3

1.2.6多条开花途径的信号整合3

1.3GmFT2a及其同源基因的研究进展4

1.4FT互作蛋白的研究进展5

1.4.1FD5

1.4.214-3-36

1.4.3BRC16

1.4.4FTIP17

1.5NaKR1蛋白的功能研究进展8

1.5.1NaKR1介导的植物成花素运输机制8

1.5.2NaKR1相关蛋白的功能研究进展8

1.6研究目的意义与技术路线10

1.6.1研究目的与意义10

1.6.2技术路线11

第2章GmNaKR1的生物信息学分析12

2.1实验材料与方法12

2.1.1生物信息学分析12

2.1.2GmNaKR1基因家族鉴定及序列分析12

2.1.3GmNaKR1共线性分析13

2.1.4GmNaKR1启动子顺式作用元件分析13

2.1.5GmNaKR1蛋白的保守序列和基因结构分析13

2.1.6GmNaKR1蛋白因结构分析13

2.2结果与分析13

2.3讨论19

2.4小结20

第3章GmNaKR1的基因表达分析21

3.1实验材料21

3.2实验方法21

3.2.1材料种植21

3.2.2样品RNA提取21

3.2.3实时荧光定量PCR22

3.3结果与分析23

3.4讨论26

3.5小结27

第4章基因克隆与农杆菌介导的烟草瞬时表达分析28

4.1实验材料28

4.2实验方法28

4.2.1材料种植28

4.2.2GmNaKR1基因克隆与鉴定28

4.2.3融合表达载体PGWB6-GmNaKR1的构建31

4.2.4烟草瞬时表达32

4.3结果与分析33

4.3.1GmNaKR1基因克隆33

4.3.2GmNaKR1烟草瞬时表达分析34

4.4讨论34

4.5小结35

第5章GmNaKR1与GmFT2a的互作验证36

5.1实验材料36

5.2实验方法36

5.2.1BiFC实验36

5.2.2Pull-down实验37

5.3结果与分析41

5.3.1BiFC实验41

5.3.2Pull-down实验42

5.4讨论43

5.5小结44

第6章GmNaKR1过表达与突变体材料的创制45

6.1实验材料45

6.2实验方法45

6.2.1过表达材料创制45

6.2.2CRISPR/Cas9技术介导的GmNaKR1突变体创制52

6.3结果与分析55

6.3.1GmNaKR1-OE材料创制与鉴定55

6.3.2Gmnakr1d创制与鉴定58