生物化学核苷酸代谢与核酸合成 (2).ppt

大肠杆菌的DNA聚合酶有三种：活性：表13-1DNA聚合酶Ⅰ（DNApolⅠ）：校对DNA聚合酶Ⅱ（DNApolⅡ）：修复DNA聚合酶Ⅲ（DNApolⅢ）：复制DNA聚合酶Ⅳ（DNApolⅣ）DNA聚合酶Ⅴ（DNApolⅤ）第30页，共64页，星期日，2025年，2月5日②参与复制的其他因子解旋酶拓扑异构酶单链结合蛋白引物酶DNA连接酶/programs/view/Ux1UrfnFtI8/第31页，共64页，星期日，2025年，2月5日(2)原核细胞DNA复制的过程DNA解链起始引物合成延伸DNA链延伸切除引物、填补缺口、连接相临的DNA片段切除和修复错配碱基终止第32页，共64页，星期日，2025年，2月5日起始第33页，共64页，星期日，2025年，2月5日第34页，共64页，星期日，2025年，2月5日引物DNA聚合酶不能发动新链的合成,只能催化已有链的延长。DNA的合成需要引物，引物为RNA。引物的合成不需要引物。在DNA模板链的一定部位，由引物合成酶催化，按5’3’的方向合成与DNA互补的引物。DNA聚合酶Ⅲ在引物RNA的3’OH上逐个加上与模板链互补的脱氧核苷酸。第35页，共64页，星期日，2025年，2月5日延伸冈崎片段DNA的两条链是反向平行的。DNA聚合酶的聚合方向是5’3’。因此存在矛盾。半不连续复制√：一条链按5’3’方向连续合成前导链另一条链的合成不连续,先按5’3’方向合成若干短的冈崎片段,再连接成一条完整的DNA链后随链第36页，共64页，星期日，2025年，2月5日3’复制叉移动的方向5’5’3’前导链5’后随链3’3’5’第37页，共64页，星期日，2025年，2月5日第38页，共64页，星期日，2025年，2月5日引物的消除和缺口的填补DNA聚合酶Ⅰ的5’3’外切酶活性将引物的核苷酸逐个除去；每个核苷酸除去后立即被与模板链相应位置碱基互补的脱氧核苷酸补上，这个反应由DNA聚合酶Ⅰ的5’3’聚合活性完成。DNA连接酶各个冈崎片段通过DNA连接酶相互连接，最终形成后随链。第39页，共64页，星期日，2025年，2月5日第40页，共64页，星期日，2025年，2月5日终止单向复制的环状DNA分子，其复制的终点就是原点。双向复制的DNA环形分子，在两个复制叉相遇时即完成复制。第41页，共64页，星期日，2025年，2月5日4真核细胞DNA的复制与原核细胞复制过程基本相似。但参与复制的酶和蛋白质与原核生物不同，复制起始的调控更复杂。第42页，共64页，星期日，2025年，2月5日共同点半保留复制；半不连续复制；需解旋酶解开双螺旋，并由SSB同单链区结合；需拓扑异构酶消除解螺旋形成的扭曲张力；需RNA引物；新链合成均有校对机制。第43页，共64页，星期日，2025年，2月5日主要差别多起点复制，复制子小而多；复制叉移