动物细胞融合与单克隆抗体 (6).ppt

关于动物细胞融合与单克隆抗体(6)第1页，共30页，星期日，2025年，2月5日(1)(1)(2)(3)(4)(5)回顾：植物体细胞杂交过程示意图第2页，共30页，星期日，2025年，2月5日A细胞B细胞人工诱导杂交细胞动物细胞融合（也称细胞杂交）：是指两个或多个细胞融合形成一个单核细胞的过程。一、动物细胞融合概念第3页，共30页，星期日，2025年，2月5日细胞膜的流动性灭活的病毒、PEG、电激等融合后的细胞进行有丝分裂，形成完整的杂交细胞2、诱导的手段？3、融合后细胞的类型？4、AB杂种细胞遗传物质有什么特点？三种AA、AB、BB含两种生物的遗传物质动物细胞融合过程1、原理？第4页，共30页，星期日，2025年，2月5日动物细胞融合技术的意义和应用第5页，共30页，星期日，2025年，2月5日比较动、植物细胞杂交技术第6页，共30页，星期日，2025年，2月5日【例1】能使动物细胞融合的特有的诱导因子是（）A.离心B.灭活的病毒C.电刺激D.振动【例2】融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点（）具有原来两个或多个细胞的遗传信息B.能无限增殖C.可形成新个体D.培养过程会贴壁【例3】动物细胞融合的作用中最重要的是（）A.克服远源杂交不亲和B.制备单克隆抗体C.培育新物种D.生产杂种细胞BB初试牛刀A第7页，共30页，星期日，2025年，2月5日抗体：能够与抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。能产生抗体的细胞是浆细胞（即效应B细胞）。温故知新二、单克隆抗体强调：效应B淋巴细胞是能够产生抗体的B淋巴细胞，下文将其简称为B淋巴细胞第8页，共30页，星期日，2025年，2月5日抗体的传统生产方法抗原反复注射动物从动物的血清中分离抗体该法制备抗体的缺点：产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。如何解决这个问题呢？单克隆抗体！第9页，共30页，星期日，2025年，2月5日读下面一段资料，找出单克隆抗体的概念人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。单克隆抗体的概念单克隆抗体：单个B细胞克隆产生的单一、特异性强的抗体问题：如何大量生产单克隆抗体？请尝试设计一个方案。第10页，共30页，星期日，2025年，2月5日一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体骨髓瘤细胞能无限增殖杂交瘤细胞动物细胞培养技术设计方案：动物细胞融合技术单克隆抗体既能产生特异性抗体，又能大量增殖的细胞1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验第11页，共30页，星期日，2025年，2月5日BB、B瘤、瘤瘤（一选）选择性培养基：只有杂交瘤细胞才能存活获得产生相应抗体的B细胞（二选）：选能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞√体外培养小鼠腹腔内培养杂交瘤细胞特点：既能产生特异性抗体，又能大量增殖。第12页，共30页，星期日，2025年，2月5日杂交细胞灭活的病毒等手段培养骨髓瘤细胞B淋巴细胞经免疫的小鼠杂交瘤细胞第一次筛选用特定的选择性培养基第二次筛选能产生特定抗体、培养条件下能无限增殖的杂交瘤细胞体外培养注射到小鼠腹腔提取单克隆抗体第13页，共30页，星期日，2025年，2月5日单克隆抗体的应用：1、诊断试剂——最广泛应用准确、高效、简易、快速单克隆抗体最主要的优点：特异性强，灵敏度高，并能大量制备。第14页，共30页，星期日，2025年，2月5日“生物导弹”＝单克隆抗体＋药物单抗导向，药物为弹头2、治疗疾病和运载药物主要用于治疗癌症治疗，单克隆抗体作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”，准确杀伤癌变细胞。第15页，共30页，星期日，2025年，2月5日两个过程动物细胞培养过程单克隆抗体制备过程三个“一”一个诱导细胞融合的新方法－－灭活病毒一个新细胞－－杂交瘤细胞一个优势－－单克隆抗体特异性强、灵敏度高的优势本节小结重点第16页，共30页，星期日，2025年，2月5日【例4】科学家用小鼠骨髓