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《GB/T38488-2021微生物快速测定方法》必威体育精装版解读

一、GB/T38488-2021标准核心要点速览

（一）标准适用范围全景扫描

1.食品领域的深度覆盖：该标准在食品领域应用广泛，涵盖各类加工食品、生鲜食材等。从日常食用的肉制品、乳制品，到蔬菜水果、饮料酒水，均能借助此标准中的方法，快速测定其中可能存在的微生物。例如，在肉制品加工企业，可通过标准方法检测产品中是否存在单核细胞增生李斯特氏菌等致病菌，保障肉制品安全。

2.生活饮用水的严格把控：对于生活饮用水，无论是来自自来水厂的供水，还是瓶装、桶装饮用水，标准中的微生物快速测定方法都能有效发挥作用。能够及时检;

测水中霍乱弧菌、沙门氏菌等微生物，确保居民用水安

全，守护大众健康。

（二）三大测定方法总览

1.分子马达法的独特之处：分子马达法通过ε亚基抗体-链霉亲和素-生物素-核酸探针复合物与目标基因结合，引起ATP合成酶转速变化，利用DHPE荧光探针检测质子跨膜转运量变化。这种创新方法突破传统

PCR技术局限，实现非扩增直接检测，为微生物检测开辟新路径。

2.近红外免疫层析法的显著优势：采用

775nm/795nm近红外荧光标记，有效避免食品基质自发荧光干扰。检测线与质控线荧光强度比阈值设定为阴;

性对照值+3SD，显著提升信噪比，使得检测结果更加

准确可靠。

3.目标区域测序法的关键要点：要求样品条形码30

天内不重复使用，通过C1≥30×103和C2≥0.3×10?双指标确保数据可靠性，标记位点≥5个时判定阳性。该方法能够高通量靶向测序，精准测定微生物。

二、分子马达法深度剖析

（一）技术原理探秘

1.核心分子机制解析：分子马达法的核心在于利用

ATP合成酶这一分子马达。当ε亚基抗体-链霉亲和素-生物素-核酸探针复合物特异性地与目标微生物的基因结合后，会对ATP合成酶的结构产生影响，进而改变其转速。ATP合成酶在正常生理状态下，通过质子跨膜转;

运来合成ATP，而转速的变化会导致质子跨膜转运量发

生改变。此时，DHPE荧光探针能够敏锐地检测到这种质子跨膜转运量的???化，从而实现对目标微生物的检测。

2.与传统PCR技术对比优势：传统PCR技术需要对目标基因进行扩增，操作过程复杂，耗时较长，且容易受到扩增效率、引物特异性等因素影响。而分子马达法无需基因扩增，直接检测目标基因与复合物结合后的分子变化，大大缩短检测时间，同时减少了因扩增过程带来的误差，检测结果更加直接可靠。

（二）适用微生物详解

1.食品中重点致病菌检测：在食品检测方面，分子马达法对单核细胞增生李斯特氏菌、副溶血性弧菌、霍乱弧菌、沙门氏菌、阪崎克罗诺杆菌（阪崎肠杆菌）、志;

贺氏菌等致病菌具有良好的检测效果。以沙门氏菌为例，

在食品加工车间环境监测或食品成品检测中，利用分子马达法能够快速确定是否存在沙门氏菌污染，及时采取措施，防止食品安全事故发生。

2.生活饮用水中致病微生物监测：对于生活饮用水，

该方法可有效检测其中的致病菌，如霍乱弧菌等。在水

源地水质监测或饮用水厂出厂水检测中，能够快速发现

致病微生物，保障居民用水安全，防止水源性疾病传播。

（三）操作流程与关键步骤把控

1.样本采集与处理规范：样本采集过程要严格遵循无菌操作原则。对于食品样本，根据食品种类和检测目的，选择合适的采样部位和采样量。例如，对于肉类食品，

应采集有代表性的肌肉组织；对于液体食品，要确保采;

样均匀。采集后的样本需及时进行处理，一般采用适当

的缓冲液进行稀释或均质，以制备成适合检测的样本溶液。

2.检测过程中的关键参数设置：在检测过程中，要精确设置仪器参数，如荧光探针的激发波长和发射波长，

确保DHPE荧光探针能够准确检测质子跨膜转运量变化。同时，要严格控制反应温度和时间，保证ε亚基抗体-

链霉亲和素-生物素-核酸探针复合物与目标基因充分结合并产生可检测的信号变化。

3.结果判读与质量控制要点：结果判读依据荧光信号强度变化。当荧光信号强度超过设定阈值时，判定为阳性结果，即样本中存在目标微生物。为保证检测结果准确可靠，需进行质量控制，定期使用已知浓度的标准菌;

株进行检测，验证检测方法的准确性和重复性。同时，

设置阴性对照和阳性对照，排除实验过程中的假阳性和假阴性结果。

三、近红外免疫层析法深度解读

（一）技术优势解析

1.近红外荧光标记抗干扰原理：近红外免疫层析法