BD FACSCalibur中文操作手册CellQuest软件.docxVIP

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BDFACSCalibur中文培训手册

第五章Cel1Quest软件

学习本章后应能够：

●用CellQuest从流式细胞仪获取3色或4色样本

●用Cel1Quest从流式细胞仪分析3色或4色样本

●将统计结果输出为电子表格

●应用Region(区)和Gate(门)生成统计

●获取和分析3色免洗绝对记数样本

5.1概述

CellQuest是从流式细胞仪上进行获取和分析数据的通用软件。CellQuest软件功能强大且灵活，并与Macintosh的多任务环境完全兼容。也可通过CellQuest调节仪器条件，设定获取最佳条件并可将其储存。

5.1.1获取

即收集并储存流式细胞仪上数据的过程。在获取前，需用您的样本来优化仪器的条件。

5.1.2分析

将获取的数据进行进一步分析。在分析时，将读取数据文件，然后可画Region(区)、

设置marker(标尺)和进行统计。在CellQuest中，可画单参数直方图、双参数点图、密度图和等高图。

5.1.3从获取到分析

在CellQuest中，从获取到分析的功能允许在数据获取结束后可从获取图转换到分析图。刚刚获取的数据及在获取时限定的格式出现在图中，如region,marker,color等。

5.2工具板

工具栏可用来画图、region,marker和文字等。点击选择。

5.2.1工具板按钮(见图1)

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Figure5-1ToolPaette

1.等高图：点击，可画等高图，可自定义图的大小。

2.选择：点击，可选择一个或多个目标，进行改大小或移动。3.3维图：点击，可画3维图，可自定义图的大小。

4.直方图：点击，可画直方图，可自定义图的大小。

5.密度图：点击，可画密度图，可自定义图的大小。

6.点图：点击，可画点图，可自定义图的大小。

7.直方图marker:点击，可在直方图上定位marker的左边界和右边界。

8.象限marker:点击，可在点图、密度图和等高图上定位marker。

9.缩小：点击，然后点击图，将放大图缩小到原大小。

10.放大：点击，然后点击图，将缩小图放大到原大小。

11.矩形region:点击，然后在点图、密度图和等高图中点击，然后拖动对角线至所需大小。

12.多边形region:点击，然后在点图、密度图和等高图中点击形成起始点，然后拖动鼠标画出多边形顶点并在起始点处点击完成多边形region。

13.直方图region:点击，可在直方图上定位region的左边界和右边界

14.椭圆形region:点击，然后在点图、密度图和等高图中点击，然后拖动对角线至所需大小。

15.箭头：点击，然后在实验文件中点击，拖出直线。

16.文本：点击，然后点击定位插入点并编辑文字。

17.计算器：如果自动复计算关闭，点击进行数据复计算。

5.3CellQuest的文件：

FCSlistmode数据文件：是流式细胞仪的标准格式数据文件(FCS2.0)。当

AqusitionControl窗口的Setup前未打×时，进行获取后自动保存的文件格式。该文件含有从流式细胞仪获取的平均2000-10000个颗粒数的数据。一个含有4参数10000细胞数的数据文件若256道分辨率则文件大小为45kb,若1024道分辨率则文件大小为85kb。

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CellQuest实验文件：您设置的图、region、gate、统计(statistics)、markers、

文字、颜色等都将保存。数据文件不在实验文件中保存。CellQuest实验