《微生物学检验》课件——第十五章 厌氧菌.pptxVIP

第十五章厌氧菌

人

概述

梭状芽胞杆菌属厌氧球菌

无芽胞厌氧杆菌

学习目标

厌氧菌的检验标本采集与送检方法、检验程序及微生物学检验方法。

2梭状芽胞杆菌属生物学特性、临床意义及微生物学检验。

无芽胞厌氧菌在正常人体的分布及临床意义

平瓣

LOLdVd

厌氧菌

●概念：

厌氧菌(anaerobicbacteria)是一类只能在低氧分压或无氧条件下生长的细菌。

●特点：

种类多

分布广

感染可发生于人体各个部位

厌氧芽胞梭菌

无芽胞厌氧菌：一般是人体正常菌群，致病力弱

厌氧菌

厌氧菌

特点

芽胞厌氧菌

无芽孢厌氧菌

种类

1个菌属

40多属

分布

自然界

人和动物体内

致病

外源性感染

多以外毒素致病

内源性感染

多为条件致病菌

厌氧菌特点

针筒运送法

无氧小瓶运送法

标本充盈运送法组织块运送法厌氧袋运送法棉拭运送法

采集

部位恰当正确采集避免污染严格厌氧及时送检

标本采集与送检

运送

种状氧困反而氧皿琼

脂平板

需氧培养厌氧培养(48小时)涂片革兰染色

生长不生长生长

临床标本

厌氧血平板、选择性培养基

厌氧培养

(48小时)

确定是否厌氧菌

挑4~6个性状不同菌落，每个菌落分别接

种厌氧菌及需氧血琼脂平板

标本采集与送检

菌落观察、形态染色分离鉴定药敏试验生化反应气-液相色谱

肉眼观察、气味、直接涂片

染色镜检

紫外灯下有无荧光

厌氧培养(48小时)

接种平板厌氧培养

需氧培养(24小时)

接种平板需氧培养

液体培养基

(增菌)

兼性厌氧或需氧菌

接种庖肉培养基

专性厌氧菌

肉眼观察：观察标本的性状(脓性、带血、气味、硫磺样颗

粒、坏死组织等)

涂片染色镜检：估计细菌数量、观察

细菌形态、染色性，以便选择培养基

和培养方法

标本观察和涂片镜检

分离培养

·非选择性培养基

心脑浸液+%5脱纤维羊血+氯化血红素+维生素K·选择培养基

七叶苷胆汁平板——培养脆弱类杆菌

卵黄平板和兔血平板——培养产气荚膜梭菌CCFA培养基——培养艰难梭菌

卡那万古冻溶血琼脂平板——培养类杆菌属、普雷沃菌属和卟啉单胞菌属

常用培养基

1厌氧罐培养法

厌氧手套箱法

厌氧培养法

厌氧器袋法

鉴定

形态与染色：

可通过革兰染色观察厌氧菌的染色性、形态及某些特殊

结构，但由于培养基种类及培养时间不同，某些菌种的染色结果易由革兰阳性变为阴性，此时可用拉丝试验(用于判断厌氧性革兰阳性菌和革兰阴性菌，方法是加30g/L氢氧化钾1滴于载玻片上，取一接种环的细菌与之混合，经1min后用接种环轻轻挑起，能拉起丝状者为革兰阴性菌，不能拉起丝状者为革兰阳性菌。)协助判断。

特点可帮助细菌的鉴定

3快速鉴定：

常采用厌氧菌快速发酵试验，其原理是根据细菌在代谢过程中产生的胞外酶试验及少量的生化基质迅速反应，能在4h观察结果，不需要在厌氧环境下培养，只需浓菌液即可。

鉴定

菌落性状：

根据细菌基本性状及是否产生色素或荧光、是否溶血等

目前国外有专供厌氧菌鉴定的快速鉴定系统，如自动微生物

鉴定系统VITEK-ANI、MicroScan-ANI等。

厌氧菌的鉴定可通过以下方法

·气液相色谱技术

·PCR

·基因探针等

这些方法具有特异性强、敏感性高及快速简便等优点。

鉴定

梭状芽胞杆菌属

PART

02

梭状芽胞杆菌属

梭状芽胞杆菌属

能形成芽胞、G+粗大杆菌

大多生存于土壤，有些寄生在人或动物肠道内

艰难梭菌

抗生素相关性腹泻和假膜性结肠炎

产气荚膜梭菌

气性坏疽

破伤风梭菌

破伤风

肉毒梭菌

肉毒中毒

特性

Characteri-tics

破伤风梭菌

C.tetanic

肉毒梭菌

C.botulinum

产气荚膜梭菌

C.Perfringens

孢子

(Spore)

圆形，顶端

椭圆形，近极端

椭圆形，近极端

很少见

菌细胞形状

细菌呈鼓槌状

网球拍状

矩形，大杆菌

鞭毛

(Flagella)

十

+

-

荚膜

(Capsule)

-

-

十

梭状芽胞杆菌属

梭菌属的形态(Clostridium:morphology)

梭状芽胞杆菌属

芽胞增强抵抗力!

C.tetaniC.botulinum

梭状芽胞杆菌属

破伤风梭菌(Clostridiumtetani)

●生物学性状

●临床意义

●微生物学检查方法

●防治原则

一、生物学性状

1.形态：菌体细长，周鞭