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由于Plac是弱启动子,单纯因乳糖的存在发生去阻遏使lac操纵子转录开放,还不能使细菌很好利用乳糖,必需同时有CAP来加强转录活性,细菌才能合成足够的酶来利用乳糖。lac操纵子的强诱导既需要有乳糖的存在又需要没有葡萄糖可供利用。通过这机制,细菌是优先利用环境中的葡萄糖,只有无葡萄糖而又有乳糖时,细菌才去充分利用乳糖。第62页,共104页,星期日,2025年,2月5日细菌对葡萄糖以外的其他糖(如阿拉伯糖、半乳糖、麦芽糖等)的利用上也有类似对乳糖利用的情况,在含有编码利用阿拉伯糖的酶类基因群的阿拉伯糖操纵子(araoperon)、半乳糖操纵子(galoperon)中也有CAP结合位点,CAP也起类似的正性调控作用。所以CAP的通用名称是分解代谢基因激活蛋白(catabolicgeneactivatorprotein)。第63页,共104页,星期日,2025年,2月5日CAP的结合对DNA构型的影响CRP在它的结合位点可使DNA成>90℃弯曲。弯曲使CAP能与启动子上的RNApol接触第64页,共104页,星期日,2025年,2月5日CAPBindingBendsDNAThisDNAbendingresultsinmoreefficientRNApolymerasebinding第65页,共104页,星期日,2025年,2月5日乳糖操纵子正性调节IPOZYACAPsiteCAPcAMP第66页,共104页,星期日,2025年,2月5日阻遏基因转录翻译阻遏蛋白R,R与操纵基因结合,阻止结合在启动子上的DDRP前移,结构基因不被转录1)无乳糖也无葡萄糖存在时:OO2)当无乳糖,有葡萄糖时:由于葡萄糖不能使阻遏蛋白失活,乳糖操纵子关闭,另外,由于有葡萄糖,cAMP含量低,CAP的正性调节不起作用总结:所以:无乳糖时,无论有无葡萄糖,操纵子关闭第67页,共104页,星期日,2025年,2月5日由于有葡萄糖,cAMP含量低,CAP的正性调节不起作用,抑制乳糖操纵子的转录,使细菌只能利用葡萄糖。3)既有乳糖,又有葡萄糖时:O乳糖与阻遏蛋白结合,使阻遏蛋白变构,失去与操纵基因结合的能力而脱落第68页,共104页,星期日,2025年,2月5日由于不含葡萄糖,细胞内cAMP含量高,cAMP与CAP结合成复合物,与DNA结合,并推动DDRP向前移动,促进转录。4)有乳糖,无葡萄糖时:mRNARNA-polO乳糖与阻遏蛋白结合,使阻遏蛋白变构,失去与操纵基因结合的能力而脱落,结合在启动子上的DDRP向前移动,结构基因被转录翻译,合成与乳糖代谢有关的酶类从而利用乳糖所以:有乳糖时,只有没有葡萄糖,操纵子才开放有葡萄糖存在,操纵子关闭第69页,共104页,星期日,2025年,2月5日※当阻遏蛋白封闭转录时,CAP对该系统不能发挥作用;※如无CAP存在,即使没有阻遏蛋白与操纵序列结合,操纵子仍无转录活性。※单纯乳糖存在时,细菌利用乳糖作碳源;※若有葡萄糖或葡萄糖/乳糖共同存在时,细菌首先利用葡萄糖。第70页,共104页,星期日,2025年,2月5日TheLacOperon:
WhenGlucoseIsPresentButNotLactoseRepressorPromoterLacYLacALacZOperatorCAPBindingRNAPol.RepressorRepressorRepressormRNAHeyman,I’mconstitutiveComeon,letmethroughNowayJose!CAPSummary第71页,共104页,星期日,2025年,2月5日TheLacOperon:
WhenGlucoseAndLactoseArePresentRepressorPromoterLacYLacALacZOperatorCAPBindingRepressorRepressormRNAHeyman,I’mconstitutiveCAPLacRepressorRepressorXRNAPol.RNAPol.Great,Icantranscribe!Sometranscriptionoccurs,butataslowrateThislactosehas
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