TWEBIO 0003-2024 人源肿瘤组织活性冻存与复苏技术规范.docx

ICS07.080

CCSC04

团 体 标 准

T/WEBIO0003—2024

人源肿瘤组织活性冻存与复苏技术规范

Technicalspecificationforactivecryopreservationandresuscitationofhumantumortissue

2024-12-30发布 2024-12-30实施

武汉东湖国家自主创新示范区生物医药行业协会??发布

T/WEBIO0003

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前 言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由武汉大学提出。

本文件由武汉东湖国家自主创新示范区生物医药行业协会归口。

本文件起草单位：武汉大学、中国典型培养物保藏中心、武汉赛尔朗灵科技有限公司、武汉大学细胞资源库、中国医学科学院基础医学研究所、天津医科大学肿瘤医院肿瘤生物样本库、浙江省肿瘤医院生物样本库、华中科技大学同济医学院、华中科技大学同济医学院附属同济医院、华中科技大学同济医学院附属协和医院、武汉儿童医院、武汉大学人民医院、武汉亚洲心脏病医院、湖南省肿瘤医院、中南大学湘雅医院、中南大学湘雅二医院、中南大学湘雅三医院、中南大学湘雅口腔医学院、复旦大学附属华山医院、陆军军医大学西南医院、重庆医科大学附属第一医院、贵州医科大学附属医院、南方医科大学皮肤病医院、湖北省医疗器械质量监督检验研究院、武汉市临床检验中心、武汉市标准化研究院。

本文件主要起草人：沈超、刘玉琴、李继新、王前进、刘霞、吴婕、杨媚媚、何静、夏司璇、王昱东、熊君、廖聪、李南、周彩虹、李海欣、郑智国、宇兴江、胡志全、杨春光、姜晓兵、章小平、李俊俊、肖晗、吴业帆、宋启斌、任海波、何正文、申竑、周恩相、黄菊芳、梁青春、王龙、邓智元、何雨鸣、陈向军、冯华、李飞、贾英、任婕、杨斌、李玲、龚洁、黄勇、任雯菁。

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人源肿瘤组织活性冻存与复苏技术规范

范围

本文件规定了人源肿瘤组织活性冻存的取样标准、冻存前预处理、深低温保存、复苏培养及质量检测的操作程序和一般原则。

本文件适用于科研用人源肿瘤组织的活性冻存与复苏。

规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T38736-2020 人类生物样本保藏伦理要求

GB/T39767-2021 人类生物样本管理规范

GB/T40352.1-2021 人类组织样本采集与处理

国卫科教发〔2023〕4号 涉及人的生命科学和医学研究伦理审查办法

术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

组织活性冻存activecryopreservationoftissue

将临床取得的肿瘤组织，经过适当的处理后进行超低温保存，且活性冻存的肿瘤组织复苏后，能分

离提取具有活性的原代细胞并传代。

原代细胞primarycell

直接从组织中分离培养的细胞，传代次数不超过10代。

完全培养基completemedium

通过在基础培养基中添加血清、必要的生长因子等添加剂等物质制备而成。

缩略语

下列缩略语适用于本文件。PBS：磷酸缓冲液

组织活性冻存

组织样本收集与运输

组织样本的收集、处理应遵循《涉及人的生命科学和医学研究伦理审查办法》和GB/T40352.1-2021的规定。

5.1.2组织样本的保藏应遵循GB/T38736-2020和GB/T39767-2021的规定。

组织样本采集前应通过伦理委员会审批，具备捐赠者或代理人签署的《知情同意书》。

组织样本采集过程中，直接接触样本的所有材料应满足无菌要求。

组织取样的要求，在手术可控范围能获取含肿瘤核心区和边缘区的组织。获取的组织块，应在清除表面血块、坏死组织、脂肪和结缔组织后，推荐剪切至不小于0.5cm×0.5cm×0.5cm组织块放入保存液内。

所取组织应尽量在4-6h内进行组织预处理，尽快经程序性降温后放入液氮冻存；若不能及时进行预处理和冻存，应将所取标本于2℃-8℃临时存放并运输。离体组织的临时保存和运输时间应不超过24h。组织预处理及质控需在无菌环境中进行。

组织样本信