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植物细胞工程课程.ppt

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BDFACE斑点杂交只需要将RNA样品点在固相膜上直接与印迹杂交则需要先将提取的总RNA或mRNA样品进交。此法可对基因的转录情况进行较详细的分析,探针杂交。此法只能鉴定基因是否转录;行电泳分离,然后转移到固相膜上,再与探针杂如RNA转录的大小及丰度等。斑点杂交与印迹杂交的区别:01证据:03解体状态,以致在体细胞胚周围出现较大的缝隙,05因而如何改善条件,减少细胞间相互竞争作用是提02在这些胚胎迅速发育过程中,相邻细胞逐渐处于04与其邻近细胞隔离开处于相对独立的情况。06高体细胞胚发生频率的重要途径。由此推测,在胚性细胞的发生与发育过程中处于相对独立状态,有利于胚胎发生潜力的表达。但生理隔离也只是相对的,并不意味着它们与周围组织在生理上完全隔离开,在体细胞胚发生与发育过程中,必须从周围细胞中取得营养、能量和激素等,不仅有相互依存关系,而且有相互竞争的关系。生理隔离可能是营养竞争的结果。02遗传稳定性:一般认为,通过体细胞胚发生途径形成再生植株是相对稳定的。理论依据是:只有那些未经过畸变的细胞才有可能形成体细胞胚。人工种子的制作,优良种质的保存和无性系繁殖等,正是基于体细胞胚的基因型与原亲本的相同性。01三.遗传稳定性与变异性宁夏枸杞叶片离体培养形成的再生植株根尖细胞染色体发生明显变异。小麦幼胚作为外植体,通过体细胞胚发生途径建立体细胞无性系,在其后代中出现广泛的变异,包括单基因控制的质量性状变异,如粒色、蜡性和颖色变异;多基因控制的数量性状变异,如株高、抽穗期变异等。0102012.变异性发生的普遍性6430◆无性系的变异是极其广泛的:五种不同愈伤组织的染色体变异愈伤组织来源观察细胞数变异细胞数变异频率(%)变异范围烟草叶片(n=24)1279877.28~96枸杞叶片(2n=24)1268164.36~48伊贝母鳞茎(2n=24)643960.913~60白兰瓜子叶(2n=24)21716676.58~162山黧豆胚根(2n=14)21115573.56~140数量变异:如核融合、核内有丝分裂、核内染色体复制等产生整倍多倍体;一些不正常的有丝分裂则导致产生非整倍体,如多极分裂、落后染色体、染色体后期桥等;01结构变异:分裂过程中染色体的重复、缺失、易位和倒位等。023.染色体数量与结构变异的原因:易位2n=144.外源植物激素在染色体变异中的作用激素成分对贝母鳞茎离体培养中染色体变异的影响激素组合观察细胞数变异细胞数变异频率(%)变异范围2,4-D551934.512~42IAA631727.45~41NAA511223.57~382.4-D+KT643960.922~60IAA+KT693652.221~48NAA+KT732331.512~41*2,4-D、IAA、NAA各lmg

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