色谱分析技术和色谱分析仪器.ppt

1.程序升温;第三节高相液相色谱仪2.程序变流速;3.组合柱;4.梯度洗脱。第127页，共190页，星期日，2025年，2月5日梯度洗脱是在色谱的分离过程中，把两种或更多的不同极性互溶洗脱液随时间按某种变化的比例混合，使流入色谱柱的洗脱液组成作连续的改变。其目的是让样品每个组分都在最佳分配系数的条件下分离出来，以获得较好的峰形。

梯度洗脱分为内梯度洗脱（高压）和外梯度洗脱（低压）两类。第三节高相液相色谱仪第128页，共190页，星期日，2025年，2月5日第三节高相液相色谱仪图5-19梯度洗脱装置原理示意图液A比例阀A液B比例阀B混合器高压泵色谱柱液A泵A液B泵B混合器色谱柱(a)外梯度洗脱(b)内梯度洗脱第129页，共190页，星期日，2025年，2月5日（三）流量控制器

高压的流动相流经色谱柱时，与固定相产生相互作用，固定相会形成一个与流动相流动方向相反的作用力，即构成一个与流向相反的压力，称之为柱反压，它将阻碍流动相的正常流动。流量控制器是为消除色谱柱反压过高对分离造成的不良影响而设计的。第三节高相液相色谱仪第130页，共190页，星期日，2025年，2月5日二、进样系统

高效液相色谱仪的进样系统，要求能将样品有效地注入到系统里去，而不破坏在色谱柱和检测器里所建立的流量平衡。理想的进样系统应能给系统带来最低限度的死体积。否则，柱效率将受到损失。第三节高相液相色谱仪第131页，共190页，星期日，2025年，2月5日进样装置有注射器和多通进样阀。为适应高压条件下进样，进样方式又有停流动相和不停流动相进样两种方式。

（一）注射器进样

高效液相色谱仪进样量一般都比较小，因而注射器进样常采用微量注射器。可分为直接注射器进样与隔断式注射器进样两种。第三节高相液相色谱仪第132页，共190页，星期日，2025年，2月5日直接注射器进样与气相色谱仪相类似。进样时注射器直接插入色谱柱上端的进样器隔膜，将样品注入到色谱柱中固定相的顶端。其结构简单，使用方便，可在不停流情况下进样。但对隔膜、弹性垫片要求耐压高，一般在压力低于14.71MPa时可以使用。第三节高相液相色谱仪第133页，共190页，星期日，2025年，2月5日2.氢火焰离子化检测器（flameioniza-tiondetector，FID）

简称氢焰检测器，是电离检测器的一种，属第二类检测器。主要基本构成环节是：电极、电离室、离子源、极化电源、本底电流补偿环节以及静电计、记录仪等。第二节气相色谱仪第95页，共190页，星期日，2025年，2月5日＋－＋－图5-13氢焰检测器基本原理图R0E0记录仪本底电流补偿环节离子源电极电离室极化电源第二节气相色谱仪第96页，共190页，星期日，2025年，2月5日氢焰检测器输出信号是电流，输出阻抗很大，其后所接的微电流放大器必须要有更高的输入阻抗，信号才能正常传递下去。可采用绝缘栅场效应管作为输入级，同时采用较高放大倍数的负反馈放大器，以保证微电流放大器具有输入阻抗高，稳定性好等特点。第二节气相色谱仪第97页，共190页，星期日，2025年，2月5日氢焰检测器是一种选择性检测器，对含碳有机物较敏感。由于氢焰检测器是通过电离的方式检测离子流，其灵敏度高，约在10-10g/s～10-12g/s。最小检测量可达10-11g/s～10-13g/s。线性范围广（5×106～5×107）。稳定性好，响应时间快。第二节气相色谱仪第98页，共190页，星期日，2025年，2月5日3.电子捕获检测器（electroncapturedetector，ECD）

可以分为两类，一类是由一个阴极（内装圆筒状β放射源3H或63Ni的池体)和一个不锈钢阳极组成。称之为放射性电子捕获检测器。另一类是非放射性电子捕获检测器。第二节气相色谱仪第99页，共190页，星期日，2025年，2月5日记录仪数据处理放大器极化电源出口63Ni放射源阳极阴极(池体)绝缘体载气＋样品图5-14电子捕获检测器基本原理图第二节气相色谱仪第100页，共190页，星期日，2025年，2月5日载气受低能β射线照射后发生电离，产生正离子和低能量的电子。如

电负性组分即是具有亲负性离子的中性分子，或对电子具有较大亲和力易捕获电子的物质。第二节气相色谱仪第101页，共190页，星期日，2025年