《动物细胞核移植》课件.pptVIP

**********************动物细胞核移植什么是细胞核移植细胞核移植是指将一个细胞的细胞核移植到另一个细胞的去核细胞质中，从而获得一个新的细胞，该细胞的遗传物质主要来自供体细胞核。核供体细胞提供细胞核的细胞，通常是具有优良性状的动物细胞。受体细胞接受供体细胞核的细胞，通常是去核的卵细胞。细胞核移植技术的发展历程11952罗伯特·布里格斯和托马斯·金首次成功地将非洲爪蟾的胚胎细胞核移植到去核的卵细胞中，并获得了发育正常的蝌蚪，这标志着细胞核移植技术的诞生。21962约翰·格登首次成功地将成年青蛙的肠道细胞核移植到去核的卵细胞中，并获得了发育正常的蝌蚪，证明了成年细胞的核仍然具有发育全能性。31996伊恩·维尔穆特和他的团队成功地克隆了第一只哺乳动物——多莉羊，标志着细胞核移植技术的突破性进展。42000科学家们陆续克隆了猪、牛、鼠等多种哺乳动物，证明了细胞核移植技术的广泛应用价值。细胞核移植的应用前景生物医药用于疾病研究、药物筛选、治疗性克隆。农业生产培育优良品种、提高牲畜生产效率、保护濒危物种。科学研究研究动物发育、遗传机制、器官移植等领域。细胞核移植的原理核供体细胞细胞核移植的核心是将一个细胞的细胞核移植到另一个细胞中，从而形成一个新的细胞。受体细胞受体细胞通常是去核卵母细胞，它提供细胞质和细胞器，为移植的细胞核提供发育所需的物质和环境。细胞核移植的主要步骤1核供体细胞的选择选择遗传特性优良的细胞2受体细胞的去核去除受体细胞的细胞核3供体细胞核的转移将供体细胞核注入去核的受体细胞4细胞融合使供体细胞核与受体细胞融合核供体细胞的选择1遗传背景选择遗传背景明确的供体细胞，确保克隆后代的遗传性状。2健康状况选择健康状况良好的供体细胞，避免克隆后代出现遗传疾病或缺陷。3发育潜力选择具有高发育潜力的供体细胞，提高克隆成功的可能性。核供体细胞的培养准备选择健康的供体细胞，确保其基因组完整，无病原体污染。将供体细胞置于合适的培养基中，并提供充足的营养物质、生长因子和氧气。控制培养温度、pH值和湿度，为细胞提供最佳的生长环境。定期监测细胞的生长状态，并进行传代培养，以保持细胞的活力和增殖能力。供体细胞核的分离选择合适的细胞选择健康的核供体细胞，保证细胞核的完整性和活性。细胞预处理对细胞进行预处理，如低温处理或酶处理，使细胞膜变得更脆弱。细胞核分离利用显微操作仪等设备，将细胞核从细胞质中分离出来。核质量评估对分离出来的细胞核进行形态学和功能性评估，确保其完整性和活性。受体细胞的去核过程1去核技术微针法、电脉冲法2细胞活性去核后细胞活力3操作精准避免细胞损伤供体细胞核的转移1精确操作使用显微注射器将核供体细胞核转移到去核的受体细胞中。2微操作技术要求操作人员具备精湛的技术和丰富的经验。3技术保障确保供体细胞核完整性和受体细胞完整性。细胞融合的实现方式1电融合法利用高压脉冲电场，使细胞膜暂时性穿孔，促进细胞融合。2化学融合法使用聚乙二醇（PEG）等化学试剂，改变细胞膜的流动性，促使细胞融合。3病毒融合法利用某些病毒的融合蛋白，介导细胞膜的融合，实现细胞融合。细胞融合的优化条件温度最佳融合温度通常在37°C左右，温度过高或过低都会影响融合效率。时间融合时间需要根据细胞类型和融合方法进行调整，一般在1-2小时内完成。化学物质常用的化学物质包括聚乙二醇(PEG)和电融合剂，可以促进细胞膜的融合。重建细胞的培养条件营养物质提供充足的葡萄糖、氨基酸、维生素等，满足重建细胞生长和代谢需求。培养基选择合适的培养基，模拟体内的环境，提供最佳的生长环境。温度和湿度控制合适的温度和湿度，为重建细胞提供稳定的生长条件。气体环境提供充足的氧气，并控制二氧化碳浓度，维持细胞的正常呼吸和代谢。重建细胞的发育评估形态学观察通过显微镜观察重建细胞的形态，判断其是否正常发育。基因表达分析检测重建细胞的基因表达谱，评估其是否与正常细胞一致。发育进程评估跟踪重建细胞的发育进程，确保其按照正常时间表进行发育。重建细胞的基因组检测基因组完整性确保重建细胞的基因组完整，避免克隆过程中发生的基因突变或丢失。基因表达谱分析重建细胞的基因表达情况，了解其与供体细胞和受体细胞的差异。重建个体的克隆成功率绵羊猪牛鼠克隆技术发展至今，成功率依然较低，不同动物的克隆成功率也不尽相同。动物细胞核移植的技术难点细胞核移植技术是一个复杂的过程，需要严格控制时间和温度。供