《细胞与分子生物学实验》01显微镜的使用-教学课件（非AI生成）.ppt

荧光蛋白转染效率观察实验结果观察及分析10X*明场观察实验结果观察及分析10X*荧光下观察实验结果观察及分析10X*设备与器材

培养液的除菌与无菌试验9’48”

无菌操作12’34”

细胞的原代培养14’32”

细胞的传代培养26’08”

细胞的冻存30’52”

细胞的复苏41’28”《细胞培养技术》规范操作***********细胞与分子生物学实验*实验课注意事项穿好白大衣，禁止喝水吃东西。做每个步骤知道怎么做，两人合作，规范操作。实验结果分析和思考题巩固实验原理、试剂用途。保持安静，禁止喧哗，做与实验无关的事情。保持整洁，器材、试剂整理，垃圾分类（有毒有害）仪器使用、试剂拿取等注意安全。别太在意结果，自己不一定做得出好的结果。*课程安排9次实验操作（3次细胞+6次生化）最后课程考试（实验操作考+实验理论考）总分=平时操作、实验报告+课程考试成绩*生物化学四大基本技术4、电泳技术（实验1）6、层析技术（实验5、6）5，7、分光光度法（实验13、p101、p133）离心法（实验9、10）分子生物学实验8，9、（p111、实验15）细胞生物学实验1，2，3、（p80、实验27、实验25）*显微镜的使用

细胞形态观察

《细胞培养技术》录像实验一*光学显微镜基本结构照明灯粗细调节推进器聚光器接口载物台切片夹物镜目镜*色差矫正（复消色差）数值孔径1.40观察的介质油镜工作距离0.21mm放大倍率指示色带蓝色—60倍弹簧物镜保护装置生产厂家平场矫正放大倍率特殊观察方式筒长（无限远系统）盖玻片厚度(0.17mm)放大倍率指示色带：红色—4X黄色—10X绿色—20X浅蓝色—40X蓝色—60X白色—100X物镜的符号*用右手握住镜臂，左手托镜座--------双手拿左眼看，右眼看纸绘图---------两眼都要用物镜选用：低----高----油，必须在卡口上目镜调节：由最低向上调，先粗后细聚光镜光度调节，光圈的大小调节放置玻片标本时,应注意标本的正反，把要观察的部分对准通光孔的正中央。粗、细调节器都不能做单方向的旋转，如一直下降会压碎玻片标本。显微镜用后，应转动粗调节器使载物台下降,取下玻片,并转动旋转盘,使物镜离开聚光镜,然后上升载物台使物镜接近镜台；目镜、物镜、反光镜等用擦镜纸擦拭干净。显微镜的使用及注意事项****作图要求2~3个细胞即可只用点和线表示深浅与明暗线条光滑均匀，点圆而均匀标注部分用直尺引出平行细线注字一般置于右侧*植物细胞有丝分裂：洋葱根尖切片前期：染色质→染色丝→染色体中期：形成赤道板。后期：着丝粒纵裂为二。末期：出现细胞板、染色体解旋成染色质。*前期(prophase)前期开始的第一个特征是染色质开始浓缩(condensation)形成染色体(chromosome）第二个特征细胞骨架解聚，有丝分裂纺锤体(mitoticspindle)开始装配,高尔基体、内质网等细胞器解体，形成小的膜泡形态最复杂，变化最丰富*中期(metaphase)所有染色体排列到赤道板(MetaphasePlate)上,标志着细胞分裂已进入中期。*后期(anaphase)排列在赤道面上的染色体的姐妹染色单体分离产生向极运动，着丝粒分散*末期(telophase)染色单体到达两极，即进入了末期,到达两极的染色单体开始去浓缩。核膜开始重新组装。核仁也开始重新组装，RNA合成功能逐渐恢复。******荧光显微镜的使用荧光显微镜的原理、构造????荧光显微镜与普通光学显微镜不同，它不是通过普通光源的照明观察标本，而是利用一定波长的光(通常是紫外光、蓝紫光)激发显微镜下标本内的荧光物质，使之发射荧光，所以，荧光显微镜的光源所起的作用不是直接照明，而是作为一种激发标本的内荧光物质的能源。我们之所以能观察标本，是由于光源的照明，而是标本内荧光物质吸收激发的光能后所呈现的荧光现象。????由此可知，荧光显微镜的特点，主要是它的光源能供给大量特定波长范围的激发光，使受检标本内的荧光物质能获得必要强度的激发光。同时，荧光显微镜必须具备相应的滤光镜系统。它是由超高压光源、滤片系统、光学系统和摄影系统等主要部件组成。**1