血脂及血浆脂蛋白检验.pptVIP

测定方法LDL-C测定没有决定性方法。目前多采用聚乙烯硫酸（PVS）沉淀法空腹血清中主要含有HDL、LDL、VLDL。用聚乙烯硫酸盐-聚乙二醇甲醚选择性地沉淀LDL，离心后上清液中韩HDL、VLD测定出上清液HDL-C和VLDL-C总和。同时测定血清总胆固醇含量。LDL-C=TC-（HDL-C+VLDL-C）0304050102聚乙烯硫酸（PVS）沉淀法实验操作LDL分离于小离心管中加血清200uI和沉淀剂100uI，混匀，室温（20℃，不得高于30℃）放置15min，然后3000rpm离心15min，取上清液与血清同时测定胆固醇。取3支试管，按下表操作加入物（ml）标准管测定管1测定管2空白管标准液0.03--——上清液--0.03--—血清----0.03--蒸馏水--酶试剂2.00--2.00--2.000.032.00混匀，置于37℃水浴箱，放置5分钟，以空白管调零点，在500nm波长处进行比色，分别读取各管的吸光度。计算测定管1吸光度上清血清胆固醇浓度=-----------------------×胆固醇标准液浓度标准管吸光度测定管2吸光度总胆固醇浓度=-----------------------×胆固醇标准液浓度标准管吸光度上清LDL-C=TC-上清液胆固醇浓度参考范围40岁以上成人2.70~3.10mmol/L合适水平3.36mmol/L危险水平4.41mmol/L由于TC水平同时也受HDL-C水平的影响，所以最好以LDL-C代替TC作为冠心病危险因素指标。LDL-C水平与冠心病的发病率呈正相关LDL-C增高是动脉粥样硬化发生发展的主要脂类危险因素临床上以LDL-C水平作高脂蛋白血症的治疗决策及其需要达到的治疗目标。【临床意义】第六节血清载脂蛋白A1和B测定ApoAⅠ是HDL的主要结构蛋白约占HDL蛋白总量的64%ApoB100是LDL的主要结构蛋白约占LDL蛋白总量的95%因此，ApoAⅠ和ApoB100可以直接反映HDL和LDL的含量。12简介比色法酶法气相色谱法高效液相色谱法同位素-稀释质谱法血清（浆）总胆固醇测定酶测定法特点：常规测定中现已广泛应用酶法，酶法具有特异性好，精密度和灵敏度。由于操作简便，试剂无腐蚀性，特别适用于自动生化分析，目前已成为测定胆固醇的主要方法。原理胆固醇酯＋H2O胆固醇＋游离脂肪酸胆固醇＋O2胆烷-4-烯-3-酮＋H2O2H2O2＋4氨基安替比林＋酚醌亚胺＋4H2O酶应用液参考血清器材试管、刻度吸管、微量加样器、分光光度计、恒温水浴箱试剂与器材实验操作取3支试管，按下表操作加入物（ml）测定管标准管空白管待测血清0.02——参考血清—0.02—蒸馏水----0.02酶应用液2.002.002.00混匀，置于37℃水浴箱，放置15分钟，以空白管调零点，在510nm波长处进行比色，分别读取各管的吸光度。计算测定管吸光度血清胆固醇（mmol/L）=------------------×参考胆固醇浓度（mmol/L）标准管吸光度参考范围10~5.70mmol/L主要缺点是：本法具有氧化酶反应途径的共同缺陷，易受到一些还原性物质如尿酸、胆红素、维生素C和谷胱甘肽等的干扰。优点：本法灵敏度高、准确度高、精密度好，线性范围宽。评价：【临床意义】影响TC水平的因素①年龄与性别；②长期的高胆固醇、高饱和脂肪酸和高热量饮食可使TC增高；③遗传因素；④其它：如缺少运动、脑力劳动、精神紧张等可能使TC升高。病理性高TC血症：见于脂肪肝、肝脏肿瘤、甲状腺功能亢进严重糖尿病、动脉粥样硬化等。病理性低TC血症：见于肝脏疾病如急性肝坏死、肝硬化，甲状腺功能亢进，恶性贫