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细胞传代致弱的禽偏肺病毒JC毒株致病性变化的研究

韦莉;刘爵;王菁;朱珊珊;阎旭;全荣;李子璇;侯磊;齐宾宾;姜海军

【摘要】将禽偏肺病毒(aMPV)JC株在Vero细胞上传代传至第50代时,细胞适

应毒株毒价为105.6TCID50/mL;雏鸡致病性试验结果显示,aMPVJC株细胞传代

第50代与亲本毒F0相比感染雏鸡发病率降低,病理变化减轻,表明第F50细胞适应

毒的毒力减弱.

【期刊名称】《中国兽医杂志》

【年(卷),期】2017(053)009

【总页数】4页(P6-8,中插1)

【关键词】禽偏肺病毒JC株;细胞适应病毒;致病性

【作者】韦莉;刘爵;王菁;朱珊珊;阎旭;全荣;李子璇;侯磊;齐宾宾;姜海军

【作者单位】北京市农林科学院畜牧兽医研究所畜禽疫病防控技术北京市重点实验

室,北京海淀100097;北京市农林科学院畜牧兽医研究所畜禽疫病防控技术北京市

重点实验室,北京海淀100097;北京市农林科学院畜牧兽医研究所畜禽疫病防控技

术北京市重点实验室,北京海淀100097;北京市农林科学院畜牧兽医研究所畜禽疫

病防控技术北京市重点实验室,北京海淀100097;北京市农林科学院畜牧兽医研究

所畜禽疫病防控技术北京市重点实验室,北京海淀100097;北京市农林科学院畜牧

兽医研究所畜禽疫病防控技术北京市重点实验室,北京海淀100097;北京市农林科

学院畜牧兽医研究所畜禽疫病防控技术北京市重点实验室,北京海淀100097;北京

市农林科学院畜牧兽医研究所畜禽疫病防控技术北京市重点实验室,北京海淀

100097;北京市农林科学院畜牧兽医研究所畜禽疫病防控技术北京市重点实验室,北

京海淀100097;北京市农林科学院畜牧兽医研究所畜禽疫病防控技术北京市重点

实验室,北京海淀100097

【正文语种】中文

【中图分类】S852.65

禽偏肺病毒(avianmetapneumovirus，aMPV)属于副黏病毒科偏肺病毒属，能够

引起火鸡、鸡、鸭以及野鸟等急性呼吸道感染以及产蛋的下降[1]。火鸡鼻气管炎、

禽鼻气管炎和肉鸡肿头综合征都与该病毒感染有关[2]。根据吸附糖蛋白G的核苷

酸序列分析和用单克隆抗体中和试验，将aMPV分为A、B、C和D4个亚型[3]。

1978年aMPV感染首先在南非报道[4]，随后在西班牙、英国、法国、以色列、

德国、匈牙利都有该病发生的报道。我国于1998年在有肿头综合征的鸡群中首次

报道分离到禽肺病毒A亚型[5]。之后在山东、黑龙江、吉林、河北、湖北、新疆

等地的部分鸡场进行aMPV血清学调查，发现我国鸡群中普遍存在aMPV感染[6-

10]。2012年又陆续报道在鸡群中分离到B和C亚型[11-12]。

aMPV可在多种原代细胞内增殖，如鸡胚成纤维细胞(CEF)、鸡胚肝细胞(CEL)、原

代火鸡鸡胚成纤维细胞(TEF)和来自于鹌鹑成纤维细胞的QT-35细胞。Patnayak

等[13]又证明了aMPV也可在多种传代细胞系中增殖，如黑长尾猴肾细胞(BGM-

70)、胎猕猴细胞(MA-104)、非洲绿猴肾细胞(Vero)、鸡成纤维细胞(DF-1)、鼠源

的McCoy细胞和叙利亚仓鼠肾细胞(BHK-21)等，不同的aMPV毒株对不同细胞

的适应性存在差异。

本研究将分离到的禽偏肺病毒C亚型JC株[12]在Vero细胞上连续传代培养，观

察第50代细胞毒的动物致病性，为禽偏肺病毒细胞适应弱毒苗的研制奠定基础。

1.1毒株、细胞、抗体和实验动物禽偏肺病毒C亚型JC株[12]由本实验室分离、

鉴定并保存。Vero细胞本研究室保存。21日龄SPF雏鸡，购自北京梅里亚维通

实验动物技术有限公司。

1.2试剂和主要仪器胎牛血清、DMEM培养基干粉、青链霉素双抗、

SuperScriptTMⅢ反转录酶，均购自Gibco公司；QiagenRNeasyMiniKit，购

自Qiagen公司。

1.3禽偏肺病毒在细胞上的传代培养Vero细胞长成单层后，用PBS洗2次，将病

鸡组织研磨液接种于细胞，37C吸附1.5h，弃吸附液，PBS洗2次，加入1%双

抗