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丙型肝炎病毒抗体(胶体金法)标准操作规程

1.检验目的

用于体外定性检测人血清或血浆样本中的丙型肝炎病毒(HCV)抗体。

2.检验程序的原理和方法

采用胶体金免疫层析技术，应用间接法原理定性检测人血清(浆)HCV抗体。

在玻璃纤维素膜上预包被金标鼠抗人IgG抗体(anti-IgGAb),在硝酸纤维素膜上检测线和

对照线处分别包被重组丙肝混合抗原(Core、NS3、NS4、NS5,源自大肠杆菌)和人IgG

抗体(丙种球蛋白)。检测阳性样本时，血清样本中HCV-Ab与胶体金标记鼠抗人IgG

抗体结合形成复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线时与预

包被的抗原结合形成“Au-anti-IgGAb-HCVAb-HCVAg”夹心物而凝聚显色，游离金标鼠抗

人IgG抗体则在对照线处与人IgG抗体结合而富集显色。阴性标本则仅在对照线处显

色，15分钟内观察结果即可。

3.性能特征

3.1用国家参考品测定，产品性能应符合以下要求。

3.1.1阴性参考品符合率：对20份阴性参考品进行检测，要求在15分钟内全部显示阴性结

果。

3.1.2阳性参考品符合率：对20份阳性参考品进行检测，要求在15分钟内全部显示阳性结

果。

3.1.3最低检出量：灵敏度1号1:8进行检测，要求在15分钟内显示阳性结果。灵敏度2

号1:64进行检测，要求在15分钟内显示阳性结果。

3.1.4精密性：用精密性参考品平行检测10次，均在15分钟内显示出清晰可辨的检测线，

且显色深度无显著差别。

3.1.5稳定性：试剂盒置37℃20天，阴性参考品符合率、阳性参考品符合率、最低检出量

和精密性均应符合要求。

3.2乙肝、人类免疫缺陷病毒(HIV)、甲肝、庚肝、戊肝、类风湿因子(RF)、红斑狼疮等各种

类型的标本不会对测试产生干扰。

3.3胆红素(342.0μmol/L)、胆固醇(20.7mmol/L)、血红蛋白(5.0g/L)、甘油三酯

(28.2mmol/L)),不影响检测结果。

4.样品类型

采集静脉血清、血浆或全血(静脉血全血)应在无菌条件下，并避免样本溶血。

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5.患者准备

患者无特殊要求，采集静脉血标本。

6.容器和添加剂类型

血清：橙色帽的真空采集管，管内含有促凝物质。

血浆或全血：含抗凝剂(EDTA、肝素、枸橼酸钠)的血浆或全血样本。

7.所需的试剂

丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒(胶体金法)。主要组成成分：

7.1丙型肝炎病毒(HCV)胶体金试纸条/卡：玻璃纤维上预包被金标小鼠抗人IgG抗体(an

i-IgGAb)，硝酸纤维素膜上检测线和对照线处分别包被重组丙型肝炎病毒混合抗原

(Core、NS3、NS4、NS5，源自大肠肝菌)和人IgG抗体(丙种球蛋白)。

7.2样本稀释液：10mM磷酸盐缓冲液(PBS，PH7.2)、2%蔗糖、2/万叠氮钠。

7.3其它组成：塑料滴管。

8.环境和安全控制

8.1实验环境应保持一定湿度，避风。避免在过高温度下进行实验。

8.2对于那些含有感染源和怀疑含有感染源的物质应有合适的生物安全保证程序，下列为有

关注意事项：

8.2.1带手套处理样本和试剂；

8.2.2不要用嘴吸样；

8.2.3不可在处理这些物品时吸烟、进食、喝饮料、美容和处理隐形眼镜；

8.2.4用消毒剂对溅出的样本或试剂进行消毒；

8.2.5按当地的有关条例来消毒和处理所有样本、试剂和潜在的污染物；

8.2.6试剂各组份在正当处理和保存的情况下直至效期都保持稳定，不能使用过效期。

8.3试验中接触到的临床样本、实验废弃物、一次性使用物品等材料应当作为潜在传染物进

行处理，并且采用相应的预防措施。

9.程序性步骤

9.1将待测标本从储存条件下取出，平衡至室温并编号。

9.2将胶体金测试卡从包装盒中取出，打开铝箔包装袋，平置于台面上。

9.3用塑料滴管加1滴(10μL)样本血清或血浆，加到测试卡上的S孔。

9.4随即滴加2滴(约100μL)样本稀释液到测试卡上的D孔。

9.5加样后，阳性标本可在1~15分钟内检出，建议15分钟后再最终观察并