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5脂氧合酶在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义

李现杰;王忠民;张明香

【摘要】目的探讨5脂氧合酶(5-LOX)在食管鳞癌组织中的表达情况,及其与肿瘤

发生、发展等生物学关系.方法收集食管鳞状上皮细胞癌(ESCC)组织53份(ESCC

组)及部分病例相应的癌旁组织(距癌组织边缘大于6cm)36份(对照组),采用RT-

PCR和免疫组化SP法检测组织中5-LOX基因表达情况,结合相关临床参数进行分

析.结果5-LOXmRNA在ESCC组、对照组组织中的相对表达系数分别为

0.659±0.155、0.382±0.108,二者比较差异有统计学意义(P＜0.05);ESCC组组织

中5-LOX蛋白阳性表达灰度值为51.853±3.793,对照组为37.112±3.404,二者比

较差异有统计学意义(P＜0.01).5-LOX的表达与肿瘤的浸润、分化程度、淋巴转移

和临床分期关系密切(P＜0.05),而与肿瘤大小、部位和大体分型无关.结论5-LOX

基因在ESCC中表达增高,且与肿瘤有无浸润、分化程度、有无淋巴结转移和临床

分期相关,提示其高表达可能参与肿瘤的发生、发展.

【期刊名称】《重庆医学》

【年(卷),期】2012(041)027

【总页数】2页(P2875-2876)

【关键词】食管;肿瘤,鳞状细胞;脂氧合酶;预后

【作者】李现杰;王忠民;张明香

【作者单位】新乡医学院第一附属医院心胸外科,河南新乡,453100;新乡医学院第

一附属医院心胸外科,河南新乡,453100;新乡医学院第一附属医院麻醉科,河南新

乡,453100

【正文语种】中文

食管癌是上消化道最常见的恶性肿瘤之一，多数为食管鳞状上皮细胞癌（ESCC）。

国内外近年研究结果表明，花生四烯酸（arachidonicacid，AA）代谢异常参与

肿瘤的发生。脂氧合酶（lipoxygenase，LOX）代谢通路是参与AA代谢的重要

途径，其关键酶是LOX，5－LOX是其同工酶中的一种，参与多种肿瘤的发生。

但5－LOX在ESCC发生、发展中的作用和生物学意义尚不清楚。本文通过检测5

－LOX基因在ESCC中的表达情况，分析探讨其与ESCC发生、发展的关系及其

临床生物学意义。

1资料与方法

1.1一般资料收集2011年5～9月本院心胸外科行食管癌根治术手术切除的新鲜

ESCC组织标本53份（ESCC组）和部分病例相应的癌旁组织（距癌组织边缘大

于6cm）36份（对照组），所取组织标本均由2位病理学专家检查确诊。男39

例，女14例；年龄43～72（59.0±7.80）岁，所有患者术前均未行化疗和放疗。

主要试剂：TRIzol试剂、DNALadder购自生工生物工程（上海）有限公司；RT

－PCR试剂盒购自宝生物（大连）工程有限公司；SP试剂盒、DAB显色试剂盒购

自北京中杉金桥生物技术有限公司；兔抗人5－LOX单克隆抗体购自北京博奥森

生物技术有限公司。设计引物序列5－LOX上游：5′－CCCGGGGCATGGAGA

GCA－3′，下游：5′GCGGTGGGGCAGCGTGTC－－3′；βactin－上游：5′

－CTATTGGCAACGAGCGGTTC－3′，下游：5′CTTAGGAGTGGGGGT－

GGC－3′，扩增片段长度分别为416bp和776bp，均由生工生物工程（上海）有

限公司合成。

1.2方法

1.2.1RT－PCR检测5－LOXmRNA表达取约100mg组织放入盛有液氮的研钵

中研磨，加入1mLTRIzol液研磨成粉末，按照TRIzolRNA提取试剂盒操作说明

步骤进行，将提取到的总mRNA溶解于40μL经DEPC处理过的去离子水中后－

80℃冰箱保存备用，用1%琼脂糖凝胶电泳及紫外分光光度计分析判断总RNA的

完整性及含量和纯度。严格按照RNAPCRKit（AMV）Ver.3.0试剂盒说明书配

制反转录反应液，每份反应液加入1μL样品DNA，混匀后在50℃条件下反应

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