微生物学检验技术 课件 27项目二十七：其他原核细胞型微生物鉴定.pptx

项目二十七

其他原核细胞型微生物鉴定;;;一、螺旋体

螺旋体是一类细长、柔软、螺旋状、运动活泼的原核细胞型微生物。;分类;A：Fontana镀银染色法；B：暗视野显微镜;（二）致病性

1.致病物质：内毒素样物质与外毒素

2.传播途径：

经粘膜或破损皮肤进入

经胎盘垂直传播

3.所致疾病

钩端螺旋体病（钩体病）

4.免疫性

病后免疫力持久，以体液免疫为主。;临床特征：

起病急、高热、乏力、全身酸痛、眼结膜充血、腓肠肌压痛、浅表淋巴结肿大。;（三）微生物学检验

1.标本采集

发病10天内取血液，1周后取尿液，有脑膜刺激者取脑脊液。

2.直接镜检

标本离心后用暗视野显微镜检查，或经Fontana镀银染色用普通光学显微镜检查，亦可用直接免疫荧光法检查。

3.分离培养标本接种Korthof培养基。

4.血清学检查

取发病初期和发病第3～4周双份血清，检测抗体效价变化。;（四）防治原则

1.预防

积极防鼠、灭鼠，加强对带菌家畜管理。

易感人群或流行疫区人群接种灭活多价钩体疫苗，加强特异性预防。

2.治疗

治疗首选青霉素，其次为庆大霉素、强力霉素等。;二、梅毒螺旋体

（一）生物学特性

Fontana镀银染色法→染成棕褐色，8～14个致密而规则的小螺旋，运动活泼。G-，不易着色。

至今尚不能用人工培养。

抵抗力弱，对温度和干燥特别敏感。

;（二）致病性

引起梅毒，人是梅毒唯一传染源。

1.先天性：母体→胎盘→胎儿

三联征：锯齿形牙、间质性角膜炎和神经性耳聋

2.后天性：性接触传播;先天梅毒儿;后天梅毒

Ⅰ期梅毒：传染性极强，破坏性小

感染后2～4周左右局部出现无痛性硬下疳。

Ⅱ期梅毒：传染性强，破坏性小

发生于硬下疳出现后6～8周，以梅毒疹为主要表现。

Ⅲ期（晚期）梅毒：传染性小，破坏性大

发生于感染2年以后，亦可长达10～15年的。除皮肤粘膜外，有明显内脏损害如心、脑等变，可危及生命。;;二期梅毒：梅毒疹;三期梅毒;（三）微生物生物学检查

1.标本采集

下疳渗出液、梅毒疹渗出液或局部淋巴结抽出液等标本检查梅毒螺旋体。

2.血清学诊断

临床以非梅毒螺旋体抗原血清试验进行过筛试验，以梅毒螺旋体抗???血清试验做确认试验。;临床以非梅毒螺旋体抗原血清试验进行过筛试验，以梅毒螺旋体抗原血清试验做确认试验。;回归热螺旋体

引起人类回归热的病原体。可分为两类。一为虱传回归热，引起流行性回归热；另一为蜱传回归热，又称地方性回归热。

临床特点为急起急退的高热，周期性反复发作。全身肌肉酸痛，肝脾肿大，重症可出现黄疸和出血倾向。;伯氏疏螺旋体

莱姆病的病原体，主要经蜱叮咬而传播。

经3～32d的潜伏期，在叮咬部位可出现一个或数个慢性移行性红斑。

晚期主要表现为慢性关节炎、慢性神经系统或皮肤异常。;二、衣原体

一类能通过滤菌器，严格细胞内寄生，具有独特发育周期的原核细胞型微生物。

;（一）生物学特性

形态、染色

一般呈圆形或卵圆形。Giemsa染色呈淡蓝色或紫色。衣原体有独特的生活周期，以两种发育类型存在。

2.生活周期

原体（EB）：为细胞外存在形式，有感染性，较小，卵圆形，中央有一致密的拟核。

始体或网状体（RB）：为细胞内繁殖型，较大，圆形或不规则形，无致密拟核。;3.培养特性

目前最常用的细胞培养法，是衣原体诊断的金标准。

4.抵抗力

抵抗力较弱，不耐热，对冷冻干燥有耐受性。不能用甘油保存。

四环素、大环内酯类抗生素或青霉素、利福平等对其有抑制作用。鹦鹉热衣原体对磺胺类药物耐药。;（二）临床意义

沙眼衣原体感染范围较广，可侵害不同的系统和器官。主要有沙眼、包涵体性结膜炎、泌尿生殖道感染（如宫颈炎、输卵管炎、附睾炎、直肠炎、新生儿肺炎及中耳炎等）、性病淋巴肉芽肿。;分类;（三）微生物学检验

1.直接细胞学检查

（1）Giemsa染色

成熟的原体，Giemsa染色为紫红色，与蓝色的宿主细胞浆成鲜明对比。始体被染呈蓝色。

（2）包涵体染色

沙眼衣原体在细胞浆内形成不同形态、密集的包涵体，包涵体内含有糖原，用Lugol碘液染色呈棕褐色斑块。;2.血清学检测

临床上多用商品诊断试剂盒，目前检测肺炎衣原体和鹦鹉热衣原体主要采用微量免疫荧光检测和酶免疫测定。应用单克隆或多克隆抗体酶免疫法检测沙眼衣原体的脂多糖。

3.分子生物学检测

用核酸杂交技术、PCR检测技术，可提高检测的敏感性和特异性。

;（四）防治原则

衣原体感染后，免疫力不强。

预防

预防应注意个人卫生，管理好家禽，取缔卖淫嫖娼等。

治疗

对病人积极治疗，可选取青霉素、四环素、利福平等药物内服或局部外用。;三、支原体

无细胞壁，细胞膜含固醇，能通过滤菌器，菌落呈荷包蛋样，能在无生命培养基中繁殖的最小原核细胞型微生物。