免疫学技术 免疫血清的制备（临床免疫检验）.pptx

免疫血清的制备

免疫血清是一种含有高效价特异性抗体的血清，一般为动物被人工注射某类抗原后制备的动物血清。通过注射抗血清也可以传递被动免疫，治疗许多疾病

前言

免疫血清

将抗原以不同途径免疫动物可从动物血清中分离得到抗体，把这类含有抗体的血清称为免疫血清或抗血清

免疫血清

多价抗原

多个B细胞克隆

（致敏的B细胞）

多克隆抗体

抗血清制备流程

免疫动物选择

免疫方案制定

动物采血

抗血清分离纯化及鉴定

抗血清的保存

免疫动物选择

动物

种系

抗血清要求

动物

个体

抗原的性质

选择适龄、健壮、无感染性疾病，体重符合要求的健康动物，一般多选择雄性动物

抗原与免疫动物种属差异越远越好，亲缘关系太近不易产生免疫应答

蛋白质类抗原对多数动物皆适合，常选用家兔和山羊

R型抗血清适用于诊断试剂

H型一般用作免疫治疗

免疫方案制定

免疫原的剂量

免疫途径

免疫间隔时间

皮内、皮下、肌肉、静脉、腹腔、脾脏、淋巴结

一般间隔10～20d为佳。两次以后的每次间隔一般为7～10d

一定范围内，免疫原的用量越大，免疫反应越强，产生的抗体效价越高

伤寒沙门菌O抗原免疫家兔的方案

动物采血

最常用的方法

多用于家兔、绵羊山羊等动物

静脉采血时家兔可用耳静脉；山羊可用颈静脉

此法多用于豚鼠大鼠等小动物

技术要求高

01

02

03

颈动脉放血法

心脏采血法

静脉采血法

抗血清分离

采集的血液多采用在室温自然凝固，然后防置37℃温育1h，之后防置4℃冰箱中待凝块收缩后分离血清

抗血清纯化

①亲和层析法

②吸附剂方法

①盐析

②凝胶过滤

③离子交换和亲和层析法

抗血清纯化

特异性抗体的纯化

IgG类抗体的纯化

抗血清鉴定

抗体效价的鉴定

抗体特异性的鉴定

抗体纯度的鉴定

抗体亲和力的鉴定

一般原则是颗粒性抗原用凝集试验

可溶性抗原用双向琼脂扩散试验

常用双向免疫扩散法进行鉴定

可采用免疫电泳、双向琼脂扩散

试验、SDS等方法鉴定

常用ELISA、RIA和平衡透析法

等进行测定

抗血清保存

4℃

保存3～6个月

-70℃～-20℃

保存2～3年

冷冻真空干燥

保存4～5年

03

01

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小结

思考题

E

C

E

1.抗血清的制备流程是什么？

2.选择免疫动物的依据是什么?