幽门螺杆菌抗原重组疫苗 .pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利说明书

(10)申请公布号CN1899610A

(43)申请公布日2007.01.24

(21)申请号CN200610054468.4

(22)申请日2006.07.20

(71)申请人中国人民解放军第三军医大学

地址400038重庆市沙坪坝区高滩岩正街30号

(72)发明人邹全明高原杨珺张卫军毛旭虎郭刚吴超石云

(74)专利代理机构重庆志合专利事务所

代理人胡荣珲

(51)Int.CI

A61K39/02

A61P31/04

权利要求说明书说明书幅图

(54)发明名称

幽门螺杆菌抗原重组疫苗

(57)摘要

本发明公开了基于幽门螺杆菌中性

粒细胞激活蛋白(NapA)抗原的重组疫苗、

其制备方法及其诱导抗幽门螺杆菌感染的

保护性免疫反应中的应用。该疫苗由作为

基本活性成分的单独的幽门螺杆菌中性粒

细胞激活蛋白(NapA)，或幽门螺杆菌中性

粒细胞激活蛋白(NapA)与粘附素HpaA、

尿素酶B亚单位活性片段(UreB414)构成的

融合蛋白质，以及一种或多种医药上可接

受佐剂和赋形剂组成。

法律状态

法律状态公告日法律状态信息法律状态

权利要求说明书

1、由作为基本活性成分的单独的幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白(NapA)或幽门螺

杆菌中性粒细胞激活蛋白(NapA)与粘附素HpaA、尿素酶B亚单位活性片段构成的

融合蛋白质，以及有一种或多种医药上可接受佐剂和赋形剂构成的重组疫苗组合物。

2、根据权利要求1的重组疫苗组合物，其中所述的佐剂是分子内佐剂。

3、根据权利要求1的重组疫苗组合物，其中所述的佐剂选自大肠杆菌不耐热肠毒

素B亚单位(LTB)、霍乱毒素CT或其B亚单位(CTB)。

4、制备权利要求1的重组疫苗组合物的方法，该方法包括以下步骤：

(1)分别提供编码中性粒细胞激活蛋白NapA、粘附素HpaA和尿素酶B亚单位活性

片段的核苷酸序列，

(2)在DNA连接酶的存在下，按适当次序连接步骤(1)的核苷酸序列，得到融合基因

序列，

(3)用步骤(2)的融合基因转化适当的宿主细胞，并在适于表达所述融合基因的条件

下，培养被转化的宿主细胞，

(4)回收并纯化步骤(3)的融合蛋白质，

(5)加入一种或多种载体或赋形剂，得到所需的重组疫苗组合物。

5、根据权利要求1的重组疫苗组合物用于诱导抗幽门螺杆菌的特异性保护性免疫

反应。

说明书

技术领域

本发明涉及重组蛋白质疫苗，特别是涉及基于幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白(Hp-

NAP)抗原的重组疫苗、其制备方法及其在预防和治疗幽门螺杆菌感染性疾病中的

应用。

背景技术

幽门螺杆菌(Helicobacterpylori，Hp)是定植于人胃粘膜的革兰氏阴性螺杆菌，世界

上约有50％的人感染幽门螺杆菌。有关幽门螺杆菌人们已经做了大量的研究工作，

包括遗传学、生理学以及致病因子等，而且也证实它是胃部疾病的主要致病因素。

对于不同个体，不同的幽门螺杆菌菌株可以导致不同的病变，从临床无症状到慢性

胃炎、消化性溃疡甚至胃癌。1998年日本学者Watanadbe等首先报道Hp感染的蒙

古沙鼠可致胃癌发生，为Hp感染能诱发胃癌提供了直接证据。

近年来研究发现，疫苗接种应该是防治Hp感染的最有效的方法。随着该菌有效的

保护性抗原的陆续发现，相应的基因克隆及动物模型的不断完善，Hp疫苗研制的

可行性大大提高，其中基因工程尿素酶亚单位疫苗已进入III期临床试验阶段。与

此同时，多亚单位融合蛋白疫苗也越来越受到人们的关注。Ruggiero等人

(RuggieroP，PeppoloniS，RappuoliR，

etal.Thequestfo