备战2025年高考 生物考点一遍过 考点81 基因工程（二）.doc

1．基因工程的操作过程与应用

（1）基因工程的操作步骤

（2）基因工程的应用：培育转基因植物和转基因动物，生产基因工程药物，进行基因治疗。

（3）目的基因导入不同受体细胞的过程

生物种类

植物

动物

微生物

常用方法

农杆菌转化法

显微注射技术

感受态细胞法

受体细胞

体细胞或受精卵

受精卵

原核细胞

转化过程

将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞染色体的DNA上→表达

将含有目的基因的表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物

Ca2＋处理细胞→感受态细胞→重组表达载体DNA分子与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子

（4）基因治疗与基因诊断的不同点

原理

操作过程

进展

基因治疗

基因表达

利用正常基因导入有基因缺陷的细胞中，以表达出正常性状来治疗(疾病)

临床实验

基因诊断

碱基互补配对

制作特定DNA探针与病人样品DNA混合，分析杂交带情况

临床应用

2．蛋白质工程

（1）流程图

写出流程图中字母代表的含义：

A．转录，B．翻译，C．分子设计，D．多肽链，E．预期功能。

（2）结果：改造了现有蛋白质或制造出新的蛋白质。

（3）应用：主要集中应用于对现有蛋白质进行改造，改良生物性状。

考向一目的基因的获取及基因表达载体的构建

1．利用人胰岛B细胞构建cDNA文库，然后通过核酸分子杂交技术从中筛选目的基因，筛选过程如下图所示。下列说法错误的是

A．cDNA文库的构建需要用到逆转录酶

B．图中的菌落是通过稀释涂布法获得的

C．核酸分子杂交的原理是碱基互补配对

D．从该文库中可筛选到胰高血糖素基因

【参考答案】D

归纳整合

几种目的基因获取方法的比较

方法

从基因文库中获取

人工合成

从基因组文

库中获取

从部分基因文库，如cDNA文库中获取

化学合成法

反转录法

过

程

2．下图是利用基因工程技术生产可食用疫苗的部分过程，其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ为四种限制性核酸内切酶。下列有关说法中正确的是

A．图示过程是基因工程的核心步骤，所需的限制性核酸内切酶均来自原核生物

B．图示中构建基因表达载体时，需用到一种限制性核酸内切酶

C．一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的核糖核苷酸序列

D．抗卡那霉素基因的存在有利于将含有抗原基因的细胞筛选出来

【答案】D

考向二基因工程的操作及应用实例分析

3．下面图1为某植物育种流程，图2表示利用农杆菌转化法获得某种转基因植物的部分操作步骤。下列相关叙述错误的是

A．图1子代Ⅰ与原种保持遗传稳定性，子代Ⅱ和子代Ⅲ选育原理相同

B．图1子代Ⅲ选育显性性状需自交多代，子代Ⅴ可能发生基因突变和染色体变异

C．图2中①过程的完成需要限制酶和DNA连接酶的参与

D．图2中⑥可与多个核糖体结合，并可以同时翻译出多种蛋白质

【参考答案】D

技法提炼

1．基因表达载体中启动子、终止子的来源

（1）如果目的基因是从自然界中已有的物种中分离出来的，在构建基因表达载体时，不需要在质粒上目的基因的前后端接上特定的启动子、终止子，因为目的基因中已含有启动子、终止子。

（2）如果目的基因是通过人工方法合成的，或通过cDNA文库获得的，则目的基因是不含启动子和终止子的。若只将基因的编码序列导入受体生物中，目的基因没有启动子、终止子，是无法转录的，因此，在构建基因表达载体时，需要在与质粒结合之前，在目的基因的前后端接上特定的启动子、终止子。

2．基因工程中的几种检测方法

4．科学家通过基因工程方法，将苏云金芽孢杆菌的Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内，并成功实现了表达，从而培育出了能抗棉铃虫的棉花植株——抗虫棉。其过程大致如下图所示：

根据题意，回答下列问题：

（1）基因工程的操作程序主要包括的四个步骤是：目的基因的获取、________________、____________________和_____________________。

（2）Ti质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有T-DNA，把目的基因插入Ti质粒的T-DNA中是利用T-DNA的______________________________特点。

（3）Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内并成功实现表达的过程，在基因工程中称为___________。

（4）将目的基因导入受体细胞的方法有很多种，该题中涉及的是____________________。

（5）目的基因能否在棉株内稳定维持和表达其遗传性质的关键是____________________，这需要通过检测才能知道，检测采用的方法是________________________________。

【答案】（1）基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定

（2）可转移至受体细胞并