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乙型肝炎病毒表面抗原操作步骤

1.检验目的;检测人血清《或血浆》中乙肝表面抗原〈HBsAg)，其阳性者为急性乙型肝炎

兆伏期或急性、慢性乙肝患者，无症状HBsAg携常者。

2.检验原理;企微孔条上预包被纯化僵必表面抗体(HBsAb)，配以酶标记抗体(HBsAb一

HRP)及TMEB等其它试剂，采用夹心法原理检测人血清《或血浆)中乙肝表

而抗诛(HBsAg7

3.试剂，亲科新创〈厦门)科技有限公司。

3.1HBsAg微孔板《96人份)3.2HBsAg酶标记抗体

3.3HBsAg阳性对赂血清3.4HBsAg阴性对赂血清

3.5浓缩洗淋液”25ml3.6底物A

3.7底物B3.8终止液(2MH2SO4)

3.9封口膜3.10自封伐

4.试剂的贮存:

直接使用，2~8C迪存至失效期避免阳光直射。

5.操作:

5.]平衡，将试剂使各组分从盒中取出，半衡件室温《〈《18C一25TC)，微孔板开封斤，余者

即时以自封袋封存。

5.2配液:浓缩洗涤液配制前充分扬匀《如有前体应充分溶解}，浓缩洗涤液和蒸馏水或去

离子水按1]，19稀释后使用。

53网号，将微孔条国定十支架，按主编号。

5.4加样:每孔中加入稀释液20boL，病人血清100uL，设阴、阳性对照各1孔，得孔加入

100uL，空方对照1孔。

5.5温育，兽37C渴育60分钟，室温平衡5分钟。

5.6洗涤:几洗涤液充分洗涤5次，洗涤完后扣十《每次应保持30一60秒的浸泡时间)。

5.7加央，每妃加入了50uUL，温浴30min洗湛液充分洗漂5次，洗涤完后扣下

5.8显色:每孔加底物A、B各50uL，轻拍混色，置37C脱置15分钟。

5.9终止:每孔加终止液SOuL，混匀。

5.10测定:用酶标仪单波长450nm或双波长450nmy/630nm测定各蕊OD值(用单波长测定

时再设空白对照-孔，30分钟内完成测定，并记汶结果)。

6.结果判定

6.1临界值《C.0.)的计算;临界值=阴性对照扎OD均值NX2.1

阴性对照OD均值大于0.1或阳性对赂小于0.4时应重新试验,小于0.05时以405计算

6.2结果判定:样品OD值S\C.O.之]者为HBsAg阳性

样品OD值8C.O.1者为HBsAg阴性

7.标本:

7.1静脉抽取空腹赃者标本3.0mL《真空采血管?，将血液族置在37它水浴中30分钟后，分

离血清。

7.2溶血标本不能用十愉测。

7.3用完的标本，应在样贞管上注册日期，放置在2一SC冰箱中保存一周。

7.4样品放置一周后，逐管如入1]:50的84消毒液，并放置4小时后，装入话疗垃圾袋由

医院专人按医疗垃坡处理。

8.注意事项

8.1每板建议设阴、阳性对照血清各两孔，设空白对照时，不加样师及酶标记抗体，其余各

步相同。

8.2洗涤时各孔均须加