人教版高考生物学一轮总复习精品课件 第10单元 生物技术与工程 课时规范练53 基因工程的应用及蛋白质工程 (4).ppt

1233.(2023·安徽质检)研究发现人溶菌酶(hLZ)是天然抗生素替代品。科学家培育出转人溶菌酶基因山羊,以大规模生产人溶菌酶(从乳汁中提取),过程如图所示。其中编号①~⑨表示过程;质粒S中的基因Leu通过控制相关酶的合成而控制亮氨酸的合成(亮氨酸是山羊细胞维持生命活动必不可少的一种必需氨基酸),基因GFP控制合成绿色荧光蛋白。四种限制性内切核酸酶的识别序列及切割位点见下表。请回答下列问题。123限制酶BamHⅠBglⅡHindⅢXbaⅠ识别序列和切割位点G↓GATCCA↓GATCTA↓AGCTTT↓CTAGA123(1)过程②需要的限制性内切核酸酶是,在③中,B与切割后的质粒S用DNA连接酶连接,在两个片段相邻处形成,获得重组质粒T。?(2)为成功筛选出含重组质粒T的成纤维细胞,质粒S中用作标记基因的是。为达到筛选目的,培养基的营养成分中特殊之处是。若用PCR检测目的基因是否成功导入受体细胞中,实验组以待测的样本DNA为模板,使用目的基因的特异性引物进行PCR扩增,同时将以目的基因片段为模板的组别作为阳性对照组,将以为模板的组别作为阴性对照组。?(3)过程⑧中(填“需要”或“不需要”)添加胚胎成纤维细胞,图中早期胚胎的(填结构)将发育成完整转基因羊个体。?BamHⅠ、HindⅢ磷酸二酯键基因Leu、基因GFP不含有亮氨酸非目的基因片段不需要内细胞团123解析(1)过程②为对目的基因进行切割,结合切割出的黏性末端GATC、AGCT可知,需要的限制性内切核酸酶是BamHⅠ、HindⅢ;B与切割后的质粒S具有相同的黏性末端,可以用DNA连接酶连接形成磷酸二酯键,构建重组质粒T。123(2)基因GFP控制合成绿色荧光蛋白、基因Leu通过控制相关酶的合成而控制亮氨酸的合成,两者都为标记基因,有助于重组质粒的筛选。为达到筛选目的,培养基的营养成分中特殊之处是不含有亮氨酸,这样能生长的菌株即为含有普通质粒和重组质粒的菌株,重组质粒GFP基因被破坏,即能在缺乏亮氨酸的培养基上生长又不能表现为绿色的即为含重组质粒的菌株。以目的基因片段为模板的组别作为阳性对照组,若实验组导入成功,则也会出现与阳性对照组一样的条带,以非目的基因片段为模板的组别作为阴性对照组,表明电泳的准确性。(3)胚胎成纤维细胞会抑制分化,过程⑧为早期胚胎培养,需要分化,不需要添加胚胎成纤维细胞;早期胚胎的囊胚期的内细胞团细胞将发育成完整转基因羊个体。本课结束课时规范练53基因工程的应用及蛋白质工程必备知识基础练123456考点一基因工程的应用1.几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分,几丁质酶可催化其水解。将几丁质酶基因转入菊花体内,可增强其抗真菌病的能力。下列有关叙述错误的是()A.将几丁质酶基因插入Ti质粒的T-DNA上构建表达载体B.可通过显微注射法将农杆菌导入菊花受体细胞C.可用PCR等技术检测目的基因是否成功导入D.可用真菌接种实验检测转基因菊花对真菌的抗性程度B123456解析Ti质粒的T-DNA可以转移到受体细胞中,并且整合到受体细胞染色体的DNA上,根据这一特点,构建表达载体时,应该将目的基因即几丁质酶基因插入Ti质粒的T-DNA上,A项正确;可通过农杆菌转化法将农杆菌导入菊花受体细胞,显微注射法是用于将目的基因导入动物细胞的方法,B项错误;根据题干信息“几丁质酶基因转入菊花体内,可增强其抗真菌病的能力”,故可用真菌接种实验检测转基因菊花对真菌的抗性程度,D项正确。1234562.科学家运用基因工程技术,将人凝血因子基因导入山羊的DNA中,培育出羊乳腺生物反应器,使羊乳汁中含有人凝血因子。下列有关叙述正确的是()A.可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵B.在该转基因羊中,人凝血因子存在于乳腺细胞,而不存在于其他细胞C.人凝血因子基因开始转录后,DNA聚合酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNAD.科学家将人凝血因子基因与乳腺蛋白基因重组在一起,从而使人凝血因子基因只在乳腺细胞中特异性表达A123456解析将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法,因此可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵,A项正确;在该转基因羊中,人凝血因子存在于所有细胞中,但只在乳腺细胞中表达,B项错误;人凝血因子基