人教版高中生物学选择性必修3生物技术与工程精品课件 第3章 基因工程 第2节 第2课时 将目的基因导入受体细胞并进行检测与鉴定 (2).ppt

2.不同分子检测原理的异同(1)检测目的基因是否插入受体DNA中、目的基因是否转录时,用的探针都是放射性同位素等标记的含有目的基因的DNA片段。检测原理都是碱基互补配对原则,只是被检测的物质不同,一个是转基因生物的基因组DNA,一个是转基因生物细胞内的mRNA。(2)进行翻译水平的检测,通常以目的基因表达产物(蛋白质)作抗原,制备相应抗体,检测转基因生物的蛋白质,利用抗原与抗体特异性结合的原理。(3)不论是复制水平、转录水平还是翻译水平的检测,都是在体外进行的。对点应用?突破3.科学家将苏云金杆菌中的Bt抗虫蛋白基因(抗虫基因)导入棉花的愈伤组织细胞,鉴定后,将含抗虫基因的受体细胞组织培养获得棉花植株。经棉铃虫饲喂实验,发现棉花植株并无抗虫性状,科学家提取棉花叶片细胞中的有关成分进行了如下操作,下列分析错误的是()A.提取细胞中的蛋白质,采用抗原—抗体杂交技术进行检测,若检测到细胞中无Bt抗虫蛋白,则说明抗虫基因不能表达B.若经A项检测确定细胞中无Bt抗虫蛋白,可采用核酸分子杂交技术检测细胞中的RNA,若检测到Bt抗虫蛋白的mRNA,则说明抗虫基因能正常表达C.若经B项检测确定细胞中无Bt抗虫蛋白的mRNA,可采用核酸分子杂交技术检测细胞中的DNA,若能检测到抗虫基因,则可能是抗虫基因反向插入载体DNA分子中或抗虫基因不能正常转录D.若经C项检测确定细胞中无抗虫基因,则可能只是载体DNA分子导入受体细胞B解析提取细胞中的蛋白质,采用抗原—抗体杂交技术进行检测,若检测到细胞中无Bt抗虫蛋白,说明抗虫基因不能表达,从而导致无抗虫性,A项正确;若经A项检测确定细胞中无Bt抗虫蛋白,可采用核酸分子杂交技术检测细胞中的RNA,若能检测到Bt抗虫蛋白的mRNA,则说明抗虫基因能转录,但不能正常翻译出蛋白质,B项错误;若经B项检测确定细胞中无Bt抗虫蛋白的mRNA,可采用核酸分子杂交技术检测细胞中的DNA,若能检测到抗虫基因,则可能是抗虫基因反向插入载体DNA分子中,导致其不能正常转录,从而不能合成Bt抗虫蛋白,C项正确;若经C项检测确定细胞中无抗虫基因,则可能只是载体DNA分子导入受体细胞,从而不能合成Bt抗虫蛋白,D项正确。4.将苏云金杆菌的抗虫蛋白基因(Bt基因)导入棉花细胞培育得到抗虫棉,但一段时间种植后发现其抗虫效果减弱,为提高转基因抗虫棉的抗虫持久性,以下采取的措施不合理的是()A.转基因棉田周围种植非抗虫棉,可降低棉铃虫抗性基因的突变率B.转入多种抗虫基因能提高抗虫持久性,因为棉铃虫基因突变频率低且不定向C.为棉铃虫提供庇护所,可使敏感型棉铃虫在种群中维持一定比例D.提高Bt基因的表达量,可降低抗虫棉种植区棉铃虫的种群密度A解析基因突变可以自发发生,且具有不定向性,突变频率与环境没有直接关系,所以在转基因棉田周围种植非抗虫棉,不能降低棉铃虫抗性基因的突变率,A项不合理;因为棉铃虫基因突变频率低且具有不定向性,因此转入多种抗虫基因能避免棉铃虫单一抗性基因频率上升,进而提高抗虫持久性,B项合理;为棉铃虫提供庇护所,使敏感型棉铃虫在种群中维持一定比例,增加抗性棉铃虫和敏感型棉铃虫交流的机会,进而可以使抗虫棉维持抗虫持久性,C项合理;提高Bt基因的表达量,即提高抗虫棉中抗虫蛋白的含量,能高效杀死棉铃虫,进而可降低抗虫棉种植区棉铃虫的种群密度,提高转基因抗虫棉的抗虫持久性,D项合理。主题三DNA片段的扩增及电泳鉴定基础知识?落实1.实验原理(1)DNA片段的扩增PCR利用了DNA的原理,通过调节温度来控制DNA双链的解聚与结合。?(2)DNA片段的电泳鉴定①DNA分子具有可解离的基团,在一定的pH下,这些基团可以带上正电荷或负电荷。在电场的作用下,这些带电分子会向着与它所带电荷________的电极移动。?热变性相反②在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的、DNA分子的等有关。?③凝胶中的DNA分子通过染色,可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来。浓度大小和构象2.实验步骤(1)DNA片段的扩增微量移液器10s(2)DNA片段的电泳鉴定电泳缓冲液电泳槽PCR产物凝胶边缘【名师点睛】实验操作提示(1)为避免外源DNA等因素的污染,PCR实验中使用的微量离心管、枪头和蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌处理。(2)缓冲液和酶应分装成小份,并在-20℃储存。使用前,将所需试剂从冰箱拿出,放在冰块上缓慢融化。(3)在向微量离心管中添加反应组分时,每吸取一种试剂后,移液器上的枪头都必须更换。(4)在进行操作时,一定要戴好一次性手套。结论语句辨一辨(1)凝胶中的DNA分子通过染色,可以在