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乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂盒

〔PCR-荧光探针“一管法〞〕

实验操作培

北京鑫诺美迪基因检测技术

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预期用途

•乙型肝炎是由乙型肝炎病毒(HBV)感染引

起的一种疾病，主要通过血和血制品、母婴

传播及性接触传播。乙型肝炎病毒感染者临

床表现多样化，潜伏期较长，最常见的临床

表现有食欲减退、恶心、呕吐、腹胀、乏力

等病症，局部患者有低热等病症。人感染

HBV后，病毒持续6个月仍未被去除者可开展

为慢性肝炎，导致肝硬化或肝癌。

•该产品采用实时荧光定量PCR扩增检测

技术，用于定量检测已确诊为HBVDNA阳性

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患者血清或血浆中的HBVDNA。

检验原理

•本试剂盒采用微量核酸释放剂快速裂解、释放血清或血

浆样本中的HBVDNA，利用针对HBV核酸保守区设计的一对

特异性引物、一条特异性荧光探针，配以PCR反响液，在荧

光定量PCR仪上，应用实时荧光定量PCR检测技术，通过荧

光信号的变化实现HBVDNA的定量检测。

•本试剂盒系采用微量核酸释放剂(MNRR)，可在一管中

进行HBVDNA核酸提取与扩增，对3l的微量血清或血浆样本

直接进行快速、准确定量的荧光PCR系统；微量核酸释放剂

在完全释放核酸的同时，还具有封闭样本中对PCR扩增具有

干扰作用的蛋白质、药物及溶血等各种因素物质的功能，防

止检测过程的假阴性。

•此外，标准品直接采用灭活后的血清质控，与样本同时

进行处理与检测，实现全程监控与准确定量。

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主要组成成份

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操作步骤及本卷须知

•一、试剂准备〔在试剂准备区进行〕

•1、取出试剂盒，室温放置，充分溶解后混

匀并瞬时离心

•注意：a、试剂要闭光放置，-20℃保存，防止反

复冻融

•b、试剂盒翻开后核酸释放剂和促荧光剂

可以4℃保存，其余成分-20℃保存，随用随取，

用完立即放回。

•c、两个质控品和四个标准品使用前可以

涡旋震荡然后瞬时离心，其它四种成分不可涡旋

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震荡，需要混匀的可轻轻颠倒混匀

•一、试剂准备〔在试剂准备区进行〕

•2、根据待测样本、HBV阴性质控品、HBV

临界阳性质控品(OT)、HBV定量标准品

(OT)Ⅰ~Ⅳ的数量，按比例取相应量的试剂参加

灭菌的离心管中，制备成PCR-mix，混匀并瞬时

离心后备用，比例如下：

注意：a、HBV酶混合物最后加，并且需要快速放回存储设备

b、加酶混合物前需润洗枪头2-3次，然后缓慢加样

c、在混匀和离心时注意闭光

d、PCR-mix可在样本处理结束后配制

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操作步骤及本卷须知

•二、样本处理〔在样本处理区进行〕

•1、取3ul核酸释放剂，参加PCR反响管

中

•注意：需要过吸加样，并且垂直参加PCR反

响管底部

•2、分别取待测样本、HBV阴性质控品、

HBV临界阳性质控品(OT)、HBV定量标准品

(OT)Ⅰ~Ⅳ各3ul参加对应的PCR反响管中，

并用移液器在管底吹打混匀3~5次

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•注意：常规吸样〔无需过吸，移液器不要碰

操作步骤及本卷须知

•二