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济南大学生物技术专业课程教学大纲

微生物与酶工程综合实验II

一、课程基本信息

课程名称

微生物与酶工程综合实验II/ComprehensiveExperimentofMicrobialEnzymeEngineeringII

课程类别

专业基础课程

课程编码

19A00415

学分

0.5

学时

总学时：24

理论：0实践：24

课程负责人

李玉梅

适用专业

生物技术

先修课程

生物化学实验

后续课程

基因工程实验

二、课程简介

微生物与酶工程综合实验II，是生物技术专业基础课程，主要开展酶工程实验，主要集中在β-半乳糖苷酶的活力单位定义、动力学参数测定、包埋法制备固定化酶及菠萝蛋白酶的提取及双水相萃取等基本知识和基本操作技能。

三、课程目标及其与毕业要求指标点的对应关系

课程目标

毕业要求

毕业要求指标点

目标1：

了解或掌握蛋白质与酶工程领域先进的技术和方法，与行业需求和学科前沿接轨。

毕业要求4：

具有综合运用所掌握的理论知识和技能，从事生物技术及其相关领域产品研发的能力、具有生物技术下游工程实践和技术革新的基本能力；

培养目标4：

学生毕业后能在工业、医药、食品、环保、农、林、牧、渔等行业的企业、事业和行政

管理部门从事与生物技术有关的应用研究、技术开发、生产管理和行政管理等工作。

目标2：

①熟练蛋白质与酶工程实验中的基本操作技术。

②熟悉蛋白质与酶工程实验中的基本研究手段和实验方法。

③能够灵活运用基本实验方法与技术解决酶工程问题。设计酶分离纯化、活力测定、动力学参数测定及固定化等实验方案。

毕业要求6：

掌握资料查询、文献检索及运用现代化信息技术获取相关信息的基本方法；具有一定的实验设计，创造实验条件，归纳、整理、分析实验结果，撰写论文，参与学术交流的能力。

培养目标3：

培养的学生应具有较强的数理基础和宽厚扎实的生物学基础理论知识，掌握良好的科学

实验技能与专业外语，了解生物技术及相关产业的发展趋势，成为具有科学创新的思维，有一定的研究、技术开发与应用和管理能力的专业性复合型人才。

目标3：

①激发学生创新思维、提升学生解决复杂工程问题能力；

②强化学生道德品质和职业素养的养成。

毕业要求8：

具有终身学习的热情和能力。

培养目标1：具备健全的人格、正确的世界观、人生观和价值观，具有良好的思想道德品质、团结协作精神、高度的社会责任感和爱国主义情怀。

四、教学安排

实验一：β-半乳糖苷酶的活力单位定义（支撑课程目标2,3）建议学时：6

[教学目标]

1、知道蛋白质与酶工程实验室安全及实验规范

2、认识蛋白质与酶工程实验常用的仪器设备；

3、熟悉酶活力单位测定的原理

4、知道酶促反应初速度测定的意义

5、学会酶活力单位定义的表征

[重点难点]

酶活力单位定义的表征

[教学方式方法]

实验讲解、演示和指导，学生分组操作

[教学内容]

1、实验室、仪器与试剂安全培训

2、实验操作安全培训

3、实验仪器的认识

4、β-半乳糖苷酶初速度时间范围测定

5、oNP标准曲线的绘制

6、β-半乳糖苷酶活力测定

实验二、β-半乳糖苷酶反应动力学参数测定（支撑课程目标2）

建议学时：6

[教学目标]

1、知道米氏方程的实际应用意义，

2、理解米氏常数（Km）和最大反应速度（Vmax）的意义及应用

3、学会双倒数法测定Km和Vmax

[重点难点]

双倒数法测定Km和Vmax

[教学方式方法]

实验讲解、演示和指导，学生分组操作

[教学内容]

1、不同浓度底物溶液的配置

2、酶活力的测定

3、实验数据作图计算及分析

实验三、海藻酸钙包埋固定化β-半乳糖苷酶（支撑课程目标2）建议学时：6

[教学目标]

1、掌握海藻酸钙包埋法固定化酶的操作技术

2、学会计算固定化酶评价指标

3、学会固定化酶活力单位的表征。

[重点难点]

固定化小球的制作技术

[教学方式方法]

实验讲解、演示和指导，学生分组操作

[教学内容]

1、包埋法制备固定化酶

2、固定化酶活力测定

3、固定化酶活力单位表征

实验四、菠萝蛋白酶的双水相萃取（支撑课程目标2）建议学时：6

[教学目标]

1、 理解双水相萃取技术分离蛋白质的原理；

2、 学会双水相萃取操作技术；

3、 计算双水相萃取评价参数（相比R，分配系数K，萃取率C）。

[重点难点]

双水相体系的参数优化

[教学方式方法]

实验讲解、演示和指导，学生分组操作

[教学内容]

1、菠萝中酶的破碎提取

2、双水相体系的设计优化

3、菠萝蛋白酶酶活力测定及评价指标计算

五、考核内容与考核方式

课程目标

考核内容

考核方式

目标1

蛋白质与酶工程基础操作

随堂测试、实验操作

目标2

蛋白质与酶工程