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SDS－PAGE测定蛋白质相对分子质量;【目的要求】;【实验原理】;CH2=CH;PAG机械强度好，有弹性，透明，化学性质稳定，改变
Acr浓度或Acr与Bis的比例可以得到不同孔径的凝胶。;SDS是在蛋白质样品中加入SDS和含有巯基乙醇的样品处理液，SDS是一种很强的阴离子表面活性剂，它可以断开分子内和分子间的氢键，破坏蛋白质分子的二级和三级结构。;蛋白质分子结合SDS阴离子后，所带负电荷的量远远超
过了它原有的净电荷，从而消除了不同种蛋白质之间所
带净电荷的差异。蛋白质的电泳迁移率主要决定于亚基
的相对分子质量。而与其所带电荷的性质无关。;将已知分子量的标准蛋白质在SDS中的电泳迁移率对分子量的对数作图，即可得到一条标准曲线。只要测得未知分子量的蛋白质在相同条件下的电泳迁移率，就能根据标准曲线求得其分子量。;1）分离胶的制备
配制12%分离胶。在烧杯中依次加入重蒸水3.35ml,分离胶缓冲液2.5ml,10%SDS0.1ml,凝胶储备液4.0ml，10%过硫酸铵50ul和TEMED10ul（两块胶的量）。由于AP和TEMED相遇后凝胶即开始聚合，所以应立即混匀混合液，用移液枪抽取凝胶液加至长、短玻璃板间的窄缝内，灌满后小心插入梳齿，避免混入气泡，37℃烘箱下聚合（约30min）。;3、蛋白质样品的处理;2）样液的准备
用移液枪小心吸取处理好的血清50ul至1.5ml的离心管中，再加入50ul上样缓冲液，混匀后沸水浴中加热3min，取出冷却后加样。;将电泳仪的正负极与电泳槽正负极相连接，打开电泳仪开关，设置电压为110V，电泳80mins,此时溴酚蓝染料达到凝胶底部，停止电泳，关闭电源。;7、结果处理;【思考题】;Stakinggel;
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