【创新方案】2016年高中生物苏教版选修三配套-专题1-1.1DNA重组技术的基本工具课件.pptVIP

一、基因工程的概念;限制酶;一、限制性核酸内切酶(限制酶)

阅读教材P4～5，分析图1－2、1－3，探究下列问题：

1．限制酶切割DNA分子时，其切割部位在哪里？具有

怎样的作用特点？

提示：(1)切割部位是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。(2)作用特点：①具有专一性。具体表现在两个方面：识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列；切割特定序列中的特定位点。②可用于DNA的切割，获取目的基因和切割载体。

2．利用限制酶切割得到的是黏性末端或平末端，二者有什么区别？

提示：(1)黏性末端：是限制酶在识别序列的中心

轴线两侧将DNA的两条链分别切开形成的，如图所示。;(2)平末端：是限制酶在识别序列的中心轴线处切开形成的，如图所示。

具有黏性末端的DNA片段能够通过互补碱基间的配对重新结合，而具有平末端的DNA片段不容易结合。;(2)两种酶在基因工程中有什么作用及应用。

提示：;如图为DNA分子结构示意图，下列对该图的描述正确的

是()

;如图为大肠杆菌及质粒载体的结构模式图，据图回答下

列问题。

(1)a代表的物质和质粒的化学本质相同，都是______，二者还具有其他共同点，如①__________，②_________(写出两条即可)。;(2)若质粒DNA分子的切割末端为—A

—TGCGC，则与之连接的目的基因切割末端应为________________；可使用________________把质粒和目的基因连接。

(3)氨苄青霉素抗性基因在质粒DNA上称为______，其作用是_______________________________________。

(4)下列常在基因工程中作为载体的是()

A．苏云金芽孢杆菌抗虫基因

B．土壤农杆菌环状RNA分子

C．大肠杆菌的质粒

D．动物细胞的染色体;基因工程中的限制酶与载体

(1)载体必须具备一个或多个限制酶的切割位点，但每种酶

的切点最好只有一个。若用于切割载体的限制酶有多个点，

则切割后质粒可能会丢失某些片段，若丢失的片段含有复制

起始点，则重组DNA分子进入受体细胞后便不能进行自主复制。

(2)限制酶切割位点所处的位置必须是在所需的标记基因之外，这样才能保证标记基因的完整性，有利于对目的基因的检测。;[关键语句]

1．基因工程突破了生殖隔离，实现了不同种生物间的基因重组。

2．不同生物基因能拼接在一起的理论基础是DNA分子都是由4种

脱氧核苷酸构成的规则的双螺旋结构。

3．外源DNA导入受体细胞表达的理论基础是密码子的通用性。

4．限制酶的作用特点是识别双链DNA分子特定的核苷酸序列，并在特定位点上切割。

5．限制酶和DNA连接酶的作用部位都是两个核苷酸间的磷酸二

酯键。

6．在基因工程中使用的载体除质粒外，还有λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。;1．科学家们经过多年的努力，创立了一种新兴生物技术——基因工程，实施该工程的最终目的是()

A．定向提取生物体的DNA分子

B．定向地对DNA分子进行人工“剪切”

C．在生物体外对DNA分子进行改造

D．定向地改造生物的遗传性状;2．下列关于限制酶的说法正确的是()

A．限制酶广泛存在于各种生物中，微生物中很少分布

B．一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列

C．不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端

D．限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键

解析：限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的，并不是广泛存在于各种生物中；一种限制酶能识别双链DNA的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开；DNA分子经限制酶切割会形成黏性末端和平末端两种。;3．下列有关DNA连接酶的叙述正确的是()

①催化具有相同的黏性末端的DNA片段之间连接

②催化具有不同的黏性末端的DNA片段之间连接

③催化两个黏性末端互补碱基间氢键的形成

④催化脱氧核糖与磷酸之间的磷酸二酯键的形成

A．①②B．③④

C．①④D．②③

解析：DNA连接酶催化相同(即互补)的黏性末端进行连

接，而不是不同的黏性末端的任意连接。DNA连接酶作用的部

位是磷酸二酯键，不是氢键。;5．下列哪项不是基因工程中经常使用的载体()

A．细菌质粒B．噬菌体

C．动植物病毒D．细菌拟核DNA

解析：载体能够在宿主细胞中复制并稳定地保存，并且具有多个限制酶切点及某些标记基因。基因工程中常用的载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等。;6．如图为某基因工程中利用的质粒简图，小箭头所指分别为限制酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，ampR