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沙眼衣原体检测;

1.标本的采集

男性病人需用尿道拭子插入尿道2～4cm，稍用力旋转数周，停留1～2s后拔出；女性病人取材时，先用鸭嘴器暴露宫颈管1cm（柱状上皮或柱状上皮-鳞状上皮移行处），用力转动数周并停留10～20s，让棉拭子充分吸附分泌物以取得足够量的上皮细胞，拔出拭子。取样前应憋尿1h以上，以避免排尿过程冲走衣原体感染的尿道柱状细胞。;

2.检测方法;

（1）直接涂片染色法：标本涂片，待自然干燥，甲醛固定5～10s后，用当日配制的姬姆萨溶液染色1h，再用95%乙醇淋洗涂片、干燥。;

（2）细胞培养法：将每份标本接种于3个培养瓶中，置37℃吸附2h后，以维持液洗涤2～3次，最后加入生长液，37℃培养3～4d，取出盖玻片，经姬姆萨染色或直接荧光染色后镜检，查包涵体。;

（3）衣原体抗原检测法：简称C-C快速法。用试剂盒检测，按试剂盒说明书规定进行操作，方便简单、快速，特异性高。;

（4）免疫荧光法：将标本涂于玻片凹孔或圆圈中，自然干燥后，丙酮或无水甲醛固定5min，漂洗，再干燥，加入30μl荧光素标记的抗沙眼衣原体单克隆抗体试剂覆盖凹孔，玻片置湿盒中于室温或37℃下作用15min，去掉多余试剂，用蒸馏水淋洗涂片，自然干燥，加一滴封固液，再加盖玻片，置显微镜下检测。;

3.结果判定;

（1）直接涂片染色法：油镜下阳性标本可在上皮细胞质内找到1～3个或更多个呈蓝色、深蓝色或暗紫色的包涵体。;

（2）细胞培养法：阳性标本碘染色包涵体呈棕黑色，姬姆萨染色呈红色。;

（3）衣原体抗原检测法：质控窗和结果窗均显示一条蓝带为阳性结果，阴性则结果窗无变化。阳性结果结合临床可确定沙眼衣原体感染，但阴性时也不能完全排除，可以细胞培养法再予确定。;

（4）免疫荧光法：阳性标本在高倍镜下可见上皮细胞内的衣原体颗粒，为单一、针尖大小、明亮的绿色荧光。在油镜下为荧光均匀、边缘光滑的圆盘样结构，也可见网状体等其他形态的衣原体颗粒。;

4.注意事项

（1）男性病人在采集标本前应禁尿至少1h，取材时适度用力以确保取得足够的上皮细胞。

（2）女性病人取材的拭子不要碰???阴道壁，以免影响结果。

（3）男性尿道的脓性分泌物不应用于培养。;

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