微生物实验一（一）、培养基的制备与灭菌.pptVIP

微生物学实验实验要求课前充分预习，上课不无故缺席，实验报告要及时上交。实验期间不得大声喧哗、服从老师的安排、注意安全。实验器材专人专用，对仪器要爱护，损坏实行赔偿制度。实验菌种和物品未经许可，不得携出室外，用后的菌种按老师要求妥善处理。维护好实验室的环境卫生，实行值日生制度。实验报告要求统一用A4纸手写实验报告封面格式1、实验课程名称2、实验项目名称3、学生所在的专业、班级、姓名、学号4、实验日期5、同组者姓名实验报告格式1、实验目的2、实验原理3、实验仪器、溶液试剂4、实验步骤5、实验结果（如绘图、列表等）6、思考题（一）培养基的制备与灭菌实验一、土壤中微生物的分离纯化一、培养基的制备目的要求明确培养基的配制原理通过对基础培养基的配制，掌握配制培养基的一般方法和步骤按培养基的用途分基础培养基鉴别培养基选择培养基按培养基的物理状态分固体培养基半固体培养基液体培养基按成分不同分天然培养基合成培养基半合成培养基基本原理培养基的配方牛肉膏蛋白胨琼脂培养基（一种天然培养基，用于分离和培养细菌）配方：牛肉膏3g蛋白胨10g氯化钠5g琼脂20g水1000mlpH7.2-7.4灭菌121℃20min高氏Ⅰ号培养基（一种合成培养基，可用于培养放线菌）配方：可溶性淀粉20gKNO31gNaCl0.5gK2HPO40.5gMgSO40.5gFeSO40.01g琼脂20g水1000mlpH7.2～7.4灭菌121℃20min固体淀粉培养基（一种鉴别培养基，用于大分子物质水解的生理生化鉴定）配方：蛋白胨10g氯化钠5g牛肉膏5g可溶性淀粉2g蒸馏水1000ml琼脂15～20g灭菌121℃20min器材溶液或试剂4mol/LNaOH，1mol/LHCl，各类培养基的配方药品。仪器或其他用具试管，三角瓶，搪瓷杯，量筒，天平，药匙，电磁炉，高压蒸气灭菌锅，pH试纸(pH5.5～9.0)，硅胶塞，棉花，报纸，记号笔等。操作步骤（一）1．计算：根据配方按照用量计算。2.称量：3．溶解：如有琼脂，要不断搅拌避免糊底。4、调节pH：用1mol/LNaOH或1mol/LHCl调节，以pH试纸或pH计测定。5．过滤：趁热用四层纱布过滤。操作步骤（二）6.分装试管：固体不超过试管高度的1/5；液体、半固体不超过试管高度的1/4或1/3。三角烧瓶：总体积的一半为限。管口或瓶口不得沾有培养基操作步骤（三）7.加塞1.正确；2.管内部分太短，外部太松；3.外部过小操作步骤（三）8.包扎：注明培养基的名称。9.灭菌：按各自培养基灭菌的温度、时间灭菌。10.搁置斜面(1/3～l/2，不能超过1/2)。11.无菌检查实验无菌器皿的准备无菌水：在试管或三角瓶内量取实验所需的自来水，经121℃20min灭菌。无菌移液吸管、培养皿：报纸包扎后，经121℃20min灭菌。了解几种灭菌方法，掌握干热灭菌法和加压蒸汽灭菌法的原理及其使用方法。