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第一讲
实验一:植物细胞的观测——植物细胞活体染色及死活鉴定
实验十三:植物组织水势的测定——小液流法
;;实验内容安排;植物生理实验课的任务;要求(参照实验指导的实验守则);实验报告的要求;植物细胞的观察;洋葱鳞片叶内表皮细胞临时装片的几个步骤;;;;
【实验原理】;液泡
pH5.5;中性红染色的原理
【实验原理】;植物细胞的观察
;
;【实验步骤与结果观察】
;思考题;植物组织水势的测定–小液流法;【实验目的】;液相平衡法:小液流法、称重法、质壁分离法
压力平衡法:压力室法
气相平衡法:露点法;;(一)原理
1、当植物组织与外液接触时发生水分交换:
★植物组织的水势低于外液的渗透势(溶质势),组织吸水,外液浓度变大;ψ植物ψS
★植物组织的水势高于外液的渗透势(溶质势),组织失水,外液浓度变小;ψ植物ψS
★若两者相等,则水分交换保持动态平衡,外液浓度保持不变;ψ植物=ψS;2、同一种物质浓度不同时其比重不一样,浓度大的比重大,把高浓度的溶液一小液滴放到低浓度溶液中时,液滴下沉;反之则上升。
3、当把浸过植物组织的溶液滴回原来相应的溶液时,小液滴可能发生上浮、下沉或不动的情况。
4、根据小液滴升降情况即可确定与植物组织相同水势的溶液浓度。根据以下公式计算出溶液的渗透势,即为植物组织的水势。;溶液渗透势的计算:
ψS=﹣iCRT
式中ψS—溶液的渗透势,以MPa为单位;
R=0.0083MPa·L·mol﹣1·K﹣1
T—绝对温度,即273+t℃;
C—溶液的质量摩尔浓度
i-溶液的等渗系数,CaCl2可用2.6。
纯水的水势是多少?;(二)实验材料
;【实验试剂与器材】;【实验步骤】;加样器的使用;取材:10片一起剪断同时投入试管中;;;;分别测定不同浓度中有色液滴的升降,找出与组织水分势相当的浓度,根据原理公式计算出组织的水势。;【结果计算】
;溶液浓度;溶液浓度;溶液浓度;结果是否正确,为什么?;注意事项:;【思考与作业】;压力室法测定植物组织???势;将叶片装入压力室钢筒,叶柄切口朝外,逐渐加压,直到导管中的液流恰好在切口处显露时,所施加的压力正好抵偿了完整植株导管中的原始负压。这时所施加的压力值(通常称为“平衡压”)将叶片中的水势提高到相当于开放大气中导管中液体渗透势ψs(sap)的水平(图C)。;实验报告总结;质壁分离法测定植物组织的渗透势
钾离子对气孔开度的影响;质壁分离法测定植物组织的渗透势;质壁分离法测定植物组织的渗透势;yw=ys+yp+yg
yw=水势;
Ys=溶质势或渗透势
Yp=压力势
yg=重力对水的自由能的影响,yg忽略不计。;实验步骤;结果:
统计各个蔗糖浓度下,质壁分离的情况(20×);画出初始质壁分离的细胞简易图(20×),对每个处理结果加以说明;计算植物细胞的渗透势。
思考题:
见书本。;钾离子对气孔开度的影响;无机离子泵
气孔张开与K+进入保卫细胞紧密相关;苹果酸代谢;蔗糖-淀粉假说;1、配置溶液:参照书本
2、撕2-3mm2的蚕豆叶表皮,每个培养皿3-4片
3、3个光照,1个黑暗,处理40分钟
4、制片观察;56;57;结果:
观察比较不同处理的表皮气孔张开的情况,画出开度简易图,对每个处理结果加以说明。
思考题:
见书本。;小结;
叶绿体色素及其理化性质
叶绿素的定量测定;实验意义;实验原理;63;类胡萝卜素胡萝卜素橙黄色不溶于水
叶黄素鲜黄色溶于有机溶剂
;与水混溶的有机溶剂:95%乙醇;80%丙酮;二、叶绿素的荧光现象;反射光(荧光);;三、叶绿素的皂化作用;四、叶绿素与类胡萝卜素的吸收光谱;;类胡萝卜素的吸收光谱;五、氢和铜对叶绿素中镁的取代;;;色素提取;结果
说明现象;
解释原因;
书后思考题。;叶绿素的定量测定
;原理
根据郎伯-比尔定律,有色溶液在某一特定波长下的光密度D与其浓度C及液层厚度L成正比.
D=kCL
k为比例系数。当溶液浓度以重量百分浓度为单位,液层厚度为1cm时,k称为比吸收系数.;;在叶绿素浓度为g/L时
663nm下:Chla80%丙酮
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